[发明专利]水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法

说明书

本发明公开了一种水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法，属于检验技术领域。本发明利用单四级杆气质联用仪(GC‑MS)筛选、定量和确证，采用Thermo TG 1701MS毛细管柱为分析柱，在正离子选择离子监测模式(SIM)下建立测定水产品中丁香酚(Eugenol，CAS：97‑53‑0)、异丁香酚(Isoeugenol，CAS：97‑57‑1)、3‑氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸盐(MS‑222，CAS：886‑86‑2)三种麻醉剂含量的方法。方法检出限丁香酚和异丁香酚为25.0μg/kg、3‑氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸盐为50.0μg/kg。该检测方法较传统仪器分析方法更为简单快捷，且线性相关性良好、具有灵敏度高、抗基质干扰、高准确性和高稳定性的特点。

技术领域

本发明属于产品安全与检测技术领域，具体涉及一种水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法。

背景技术

随着人们生活水平提高，对鲜活水产品需求日益增加。长途运输活体水产品，容易导致活体水生动物产生应激反应，出现碰伤及大量死亡现象。运输过程对活体水生动物进行麻醉是提高运量和成活率的有效手段，因此在流通过程使用麻醉剂已成为常态。欧盟、美国、日本、韩国、澳大利亚、新西兰、智利等国均批准了几种麻醉剂用于食用水产品。目前，国外批准使用的麻醉剂有：3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸盐(MS222)、丁香酚(Eugenol)和异丁香酚(Isoeugenol)。MS222麻醉效果好、代谢速度快，多数国家均允许使用；异丁香酚是许多商品渔用麻醉剂的主要成分；丁香酚以其高效、低价、方便购买的特点在国内水产运输领域广泛使用。当前我国尚未批准麻醉剂用于食用水产品，也未制定相关限量标准。水产经销商在使用上往往是凭经验，只要不造成大量死亡，并不顾及使用量。活体水产品运输到达目的地后，销售商也只等到鱼、虾苏醒就进行销售，没有进行必要的停药期暂养，卖到消费者手中的活鱼体内仍然有较高麻醉剂残留。

因此，需要开发制定水产品中麻醉剂的高效检测方法，以便为相关科研工作提供检测手段，还可为行业主管部门掌握水产品中麻醉剂残留状况，开展渔用麻醉剂风险管理提供技术支持。

CN 202010138679.6公开了一种快速检测水产品中丁香酚类麻醉剂的方法，包括分离液制备、待测液制备、烯烃双键结构检测、生成氨基甲酸酯结构及其检测和判定，利用高锰酸钾的显色反应、转化生成氨基甲酸酯结构、检测氨基甲酸酯结构来判定水产品中是否含有丁香酚类麻醉剂。本发明在不使用大型仪器的情况下，可以准确检测水产品中是否添加丁香酚类麻醉剂。该发明的不足在于三个方面：(1) 利用显色反应进行检测，需要目标物的浓度水平较高，难以实现高灵敏度的检测，该专利中未提及方法灵敏度的具体数值。(2)依据该检测方法原理，实际为检测提取液中烯烃双键结构的化合物，而烯烃双键结构并非丁香酚所特有，因此该方法在低浓度水平容易产生假阳性。(3)MS222是目前国际允许使用范围最广的麻醉剂，该方法不能检测该化合物。

CN 201811030195.9本发明公开了一种水产品中七种麻醉剂分析快速检测方法，属于检验技术领域。利用三重四级杆气质联用质谱(GC-MS/MS)筛选、定量和确证的原理，采用硅胶固相萃取柱，HP-5MSUI 毛细管柱为分析柱，在电喷雾正离子多反应监测模式(MRM)下建立测定水产品中丁香酚、甲基丁香酚、异丁香酚、乙酸丁香酚酯、甲基异丁香酚、乙酸异丁香酚酯和三卡因7种麻醉剂的方法。该检测方法较传统仪器分析方法更为简单快捷，且线性相关性良好、检出限低至2.0μg/kg、具有灵敏度高、抗基质干扰、高准确性和高稳定性的特点。该发明的不足在两个方面：(1)前处理过程采用硅胶固相萃取柱，操作较为繁琐，短时间内难以实现大批量样品前处理。(2)三重四级杆气质联用质谱仪设备昂贵，在科研和检测机构配备并不普及，方法难以推广使用。

发明内容

本发明目的在于提供采用水产品中三种常用麻醉剂的快速检测的方法。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案是：一种采用单四级杆气质联用仪检测水产品中三种麻醉剂的方法，所述的三种麻醉剂分别为3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸盐、丁香酚和异丁香酚，方法包括下列步骤：