[发明专利]水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法

权利要求书

1.水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法，所述的三种麻醉剂分别为3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸盐、丁香酚和异丁香酚，方法包括下列步骤：

第一步：从水产品中提取麻醉剂并进行净化，得到待测样液：

1)将均质样品置于第一离心管中，加入提取液，样品和提取液的质量体积比为1:6.5-7.5g/ml，所述提取液为乙腈：二氯甲烷体积比＝8.5:1.5-7.5:2.5的混合液；提取液和样品混匀后超声提取5～8min，3000-4000转/min离心5-15min，移取上清液至第二离心管中；

2)液-液萃取净化，包括下列步骤：

S1、向第二离心管清液中依次加入二氯甲烷，0.005-0.015M的NaOH溶液，有机相中二氯甲烷含量大于35％，充分混合后静置；NaOH溶液的加入量为使上清液的pH为9-12之间；

S2、3000-4000转/min离心4-10min；离心分层后用pH试纸测上层水相溶液，如pH接近中性，用0.05-0.15M的NaOH溶液调节pH至9～10之间，并重新混合、离心；

S3、将步骤S2得到下层有机清液转到第四离心管中，该下层有机清液浓缩后为待测样液；

第二步：对第一步得到的待测样液采用单四级杆气质联用仪进行分析；

气相色谱分析条件为：色谱柱：Thermo TG 1701MS毛细管柱,30m×0.32mm×0.25μm；GC条件：载气：高纯氦气，纯度为99.9995％，恒流流速1.0mL/min；进样口温度：270℃；升温程序：初始温度为80℃，保持0.5min，然后以7℃/min升至122℃，保持15min，再以7℃/min升至150℃，并保持8.5min，以35℃/min升至240℃，保持4min；进样方式：不分流；进样体积：1.0μL；

选择离子监测模式；离子源：EI源；离子源温度：270℃；离子化能量：70eV；溶剂延迟：15.0min；传输线温度：260℃。

2.根据权利要求1所述的水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法，其特征在于：第一步所述的提取液为按体积比，乙腈：二氯甲烷＝8：2。

3.根据权利要求1所述的水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法，其特征在于：第一步从水产品中提取麻醉剂的方法包括：将1.00g均质样品置于第一离心管中，加入提取液5mL，涡旋混匀后超声提取5～8min，3500转/min离心10min，移取上清液至第二离心管中，再向第一离心管加入提取液2mL，涡旋混匀后超声提取5～8min，3500转/min离心10min，合并上清液于第二离心管中，待液-液萃取净化。

4.根据权利要求3所述的水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法，其特征在于：所述液-液萃取净化包括下列步骤：

S1、向第二离心管清液中依次加入3.5mL二氯甲烷，0.01M的NaoH溶液2ml，充分混合后静置5min；

S2、3500转/min离心5min；离心分层后用pH试纸测上层水相溶液应为弱碱性，pH9，如pH接近中性，用0.1M的NaoH溶液调节pH至9～10之间，并重新混合、离心；

S3、将上层水相溶液转到另外一支15mL塑料离心管中；下层有机清液转到15mL玻璃离心管中；

S4、向装上层水相溶液塑料离心管中加入4mL二氯甲烷，充分混合后静置3min，3500转/min离心3min，用一次性塑料吸管去掉上层水相；合并下层有机相清液于玻璃离心管中。

5.根据权利要求4所述的水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法，其特征在于：还包括如下步骤：

S5、用氮吹仪40℃加热，氮气吹到1mL，加入2ug/mL内标液200uL，用乙酸乙酯定容到2mL，涡旋混合后过0.22μm有机微孔滤膜，滤液采用单四级杆气质联用仪进行分析。

6.根据权利要求5所述的水产品中三种常用麻醉剂的快速检测方法，其特征在于：内标液为甲基丁香酚和甲基-3-氨基苯甲酸酯的混合物。