[发明专利]MDM2抑制剂Nutlin-3a在制备激活内质网应激诱导的癌细胞凋亡药物中的应用

说明书

本发明公开了一种MDM2抑制剂Nutlin‑3a在制备激活内质网应激诱导的癌细胞凋亡药物中的应用。通过实验证实，MDM2抑制剂Nutlin‑3a可通过增加胞质内钙离子浓度来诱导内质网应激的发生，从而激活死亡受体通路诱导结肠癌细胞凋亡。本发明还公开了一种MDM2抑制剂Nutlin‑3a与内质网应激激活剂的抗肿瘤的药物组合物，体内外实验均证实该药物组合物在结肠癌治疗方面具有显著的协同作用和良好的抗肿瘤效果。

技术领域

本发明涉及结肠癌细胞内质网应激和联合用药领域，更具体地，涉及MDM2抑制剂Nutlin-3a在制备激活内质网应激诱导的癌细胞凋亡药物中的应用。

背景技术

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，约占全世界每年确诊癌症和癌症相关死亡人数的10％，每年新增病例超过100万。结直肠癌的发生发展是一个多因素参与的复杂过程，如PI3K/AKT上调，P53基因突变等因素都可能诱导和促进结肠癌的发生。

鼠双微基因2(mouse double minute 2，MDM2)是p53最重要的负性调控因子。研究表明，许多癌症患者体内都存在着p53野生型功能的丧失，有两个重要的原因能导致p53抑癌功能的丧失，一个是p53蛋白内部结构发生突变，另一个是MDM2与p53形成负反馈，从而抑制p53功能。为此，近年来人们研发了多种MDM2抑制剂，其中Nutlin-3a为第一类MDM2小分子抑制剂，它可以与MDM2结合从而竞争性抑制MDM2与p53的结合，从而诱导p53积聚并恢复其转录活性，诱导肿瘤细胞发生凋亡。目前对于Nutlin-3a体内外研究已经被广泛报道，但是其对结肠癌生长和凋亡的调控研究的还很少。

内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress，ERS)是由于生化、生理和病理等刺激因素对内质网环境的刺激造成的内质网腔内错误折叠与未折叠蛋白聚集以及钙离子平衡紊乱等状况，从而激活未折叠蛋白反应、内质网超负荷反应和caspase-12介导的凋亡通路等信号途径的反应过程。内质网应激激活的未折叠蛋白反应最初是为了恢复内质网的稳态，对细胞起保护作用，但持续严重的内质网应激能够诱导肿瘤凋亡。最近的研究表明，很多抗肿瘤药物在发挥诱导肿瘤细胞凋亡的过程中也会引起内质网应激的发生。

细胞凋亡(Apoptosis)又称程序性细胞死亡，是一个生理性的细胞自主有序的自我毁灭过程，主要有外源性死亡受体途径、内源性线粒体凋亡途径和内质网应激三种凋亡途径。线粒体途径通过Bcl-2家族成员Bax和Bak激活。外源性死亡受体途径在促凋亡配体与TNF家族受体结合时被激活，并被诱饵受体(DcRs)的负调控。ERS介导的凋亡途径主要有GADD153/CHOP通路、ASK1－JNK通路和caspase－12通路三种。很多抗肿瘤药物通过诱导细胞凋亡的发生发挥其抗肿瘤作用，其中MDM2抑制剂Nutlin-3a通过外源性死亡受体途径诱导结肠癌细胞发生凋亡的报道鲜有报道。

另外，迄今为止，关于MDM2抑制剂Nutlin-3a激活内质网应激来调控外源性死亡受体凋亡途径诱导细胞凋亡的作用，国内外还未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供MDM2抑制剂Nutlin-3a在制备激活内质网应激诱导的癌细胞凋亡的药物中的应用，且其与内质网应激激活剂联合使用可显著提高对癌细胞的杀伤作用；该MDM2抑制剂Nutlin-3a通过影响内质网应激相关蛋白CHOP的表达，从而激活外源性死亡受体凋亡途径，进而诱导结肠癌细胞发生凋亡。

为实现上述目的，本发明提供一种MDM2抑制剂Nutlin-3a在制备激活内质网应激诱导的癌细胞凋亡的药物中的应用。

优选地，所述MDM2抑制剂Nutlin-3a通过增加胞质内钙离子浓度激活内质网应激。

优选地，所述MDM2抑制剂Nutlin-3a用于制备内质网应激相关蛋白XBP1α、BIP、p-EIF-2α、ATF4、CHOP的表达促进剂。