[发明专利]一种血清白蛋白的脱脂方法

说明书

本发明公开了一种血清白蛋白的脱脂方法。本发明提供了切向流过滤技术在对血清白蛋白进行脱脂中的应用。本发明还提供了一种血清白蛋白的脱脂方法，包括如下步骤：将血清白蛋白在特定溶液条件下，通过切向流过滤技术将白蛋白与结合物分离；所述特定溶液条件为能够实现白蛋白和所述结合物分离的溶液条件。本发明白蛋白脱脂效果可以达到白蛋白中脂肪酸含量不高于5μg/g白蛋白的水平，优于目前其他技术方案可以达到的白蛋白脱脂水平；血清白蛋白回收率不低于97％，优于活性炭吸附脱脂技术；切向流过滤膜可以多次重复使用，工艺简单，通过线性放大切向流装置膜面积可以处理不同体积料液，利于工业化应用推广。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种血清白蛋白的脱脂方法。

背景技术

白蛋白是血浆中含量最丰富的蛋白质，并广泛存在于淋巴系统和肌肉组织中。白蛋白的生理功能主要有维持血液渗透压平衡、结合并运输内源或外源小分子物质、抗氧化及表现脂酶催化活性等。

白蛋白是一种重要的生物制品，人血白蛋白用于血浆扩容、药物运输和干细胞培养等领域，牛血清白蛋白作为稳定剂做用作生物试剂的稳定成分。

白蛋白是血液系统中最重要的非特异性运输蛋白，白蛋白能够结合阴离子，也可以结合阳离子；不仅能够结合运输内源性代谢产物(例如脂肪酸、激素和酶)，而且还可以结合运输外源性药物，特别是脂溶性药物。

脱脂白蛋白是指脱去白蛋白本身携带的全部或部分脂类结合物后的白蛋白，脱脂白蛋白由于脱去了原本结合的脂肪酸类分子，具有更高的外源分子结合能力，常用于制备药物结合和释放系统。另外脱脂白蛋白也用于干细胞培养领域。

目前白蛋白脱脂的技术手段有活性炭处理(申请号201480030956.4)、离子交换处理(Scheider W,Fuller J K.An effective method for defatting albumin usingresin columns[J].Biochimica et Biophysica Acta,1970,221(2):376-378.Cameron R,Davies J,Adcock W,et al.The Removal of Model Viruses,Poliovirus type 1andCanine Parvovirus,During the Purification of Human Albumin using Ion-exchangeChromatographic Procedures[J].Biologicals,1997,25(4):391-401.)和加热处理(Tanaka K,Shigueoka E M,Sawatani E,et al.Purification of human albumin by thecombination of the method of Cohn with liquid chromatography[J].BrazilianJournal of Medical and Biological Research,1998,31(11):1383-1388.)。活性炭处理法需要将高比面积的活性炭加入到白蛋白溶液中，由于活性炭对于蛋白等小分子无选择性的非特异吸附性质，会有部分白蛋白吸附到活性炭上，导致白蛋白回收率较低。离子交换处理法，需要开发白蛋白与脂类分子通过层析分离的工艺，工艺开发过程较复杂，工艺包括平衡、上样吸附、洗脱、再生等步骤，工序较为复杂，且该工艺方法需要整套层析纯化系统支持，固定投入较大。加热处理所披露方法需要采用离心法去除加热后形成的脂肪酸沉淀，离心法处理体积有限，工艺需要较长时间。

发明内容

本发明旨在提供一种脱去血清白蛋白脂类结合物的技术，用以制备脱脂白蛋白。本发明为达到上述目的，采用了切向流超滤技术为主体的方案，在特定条件下可以实现白蛋白与其脂类结合物分离的效果。

第一方面，本发明要求保护切向流过滤技术在对血清白蛋白进行脱脂中的应用。

第二方面，本发明要求保护一种血清白蛋白的脱脂方法。