[发明专利]一种离体肝肾灌注系统及肝细胞再生方法有效
申请号: | 202110271389.3 | 申请日: | 2021-03-12 |
公开(公告)号: | CN112980683B | 公开(公告)日: | 2023-03-17 |
发明(设计)人: | 周明;欧映廷;覃小玲;欧焕芳 | 申请(专利权)人: | 立沃生物科技(深圳)有限公司 |
主分类号: | C12M3/00 | 分类号: | C12M3/00;C12M1/34;C12M1/24;C12M1/04;C12N5/071;C12N5/0775 |
代理公司: | 深圳市中科创为专利代理有限公司 44384 | 代理人: | 徐方星;王建成 |
地址: | 518000 广东省深圳市大鹏新区葵涌街*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 离体肝肾 灌注 系统 肝细胞 再生 方法 | ||
1.一种离体肝肾灌注系统,其特征在于,包括:第一蠕动泵,第二蠕动泵,肝脏培养室,肾脏培养室,分别连通所述肝脏培养室、肾脏培养室的第一导管、第二导管,与所述肝脏培养室连通的加入口,与所述肾脏培养室连通的输出口;所述第一蠕动泵的泵头夹住所述第一导管,所述第二蠕动泵的泵头夹住所述第二导管;所述肝脏培养室、肾脏培养室、第一导管、第二导管均充有肝细胞培养液;所述肝细胞培养液为:添加0.05vol%-0.15vol%的携氧载体的基础培养液,所述携氧载体,用于给培养的组织供氧;所述加入口、输出口均设置在第一导管上,所述加入口靠近肝脏培养室,所述输出口靠近肾脏培养室,所述第一蠕动泵的泵头设置在加入口与输出口之间;
所述基础培养液由以下物质组成:(1±0.015)%v/v的ITS通用型培养添加剂、(2±0.03)mmol/L的L-谷氨酰胺、(10±0.15)μg/L的表皮生长因子、(18±0.25)mg/L的氢化可的松、(40±0.60)μg/L的地塞米松、(1±0.015)%v/v的青链霉素、50-500μg/mL硫酸亚铁和(5±0.075)%v/v的胎牛血清;
所述携氧载体,由以下体积比的物质组成,携氧纳米载体:普朗尼克F-68(10%):甘油:水=(3-4):(0.7-1.3):(0.1-0.3):(4-6),所述携氧纳米载体为全氟萘烷或者全氟三丙胺;其制备方法为:将携氧纳米载体、10vol%普朗尼克F-68、甘油、水混合后,在0℃-6℃的温度下,15000-45000rpm搅拌1min-25min,然后通氧气20s-30min,获得携氧载体。
2.根据权利要求1所述的一种离体肝肾灌注系统,其特征在于,离体肝肾灌注装置在组装前,肝脏培养室、肾脏培养室、第一导管、第二导管、加入口、输出口均需要在120℃、90Kpa下灭菌15-30分钟;所述加入口、输出口均为三通,所述肝脏培养室、肾脏培养室均为500ml-5L的培养瓶。
3.根据权利要求1所述的一种离体肝肾灌注系统,其特征在于,还包括:安装在所述第二导管上的检测装置;所述检测装置设置在第二蠕动泵的泵头与肝脏培养室之间。
4.根据权利要求3所述的一种离体肝肾灌注系统,其特征在于,所述检测装置为明德生物PT1000血气分析平台。
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