[发明专利]一种叶酸对映异构体含量的检测方法

权利要求书

1.一种叶酸对映异构体含量的检测方法，其特征在于，检测条件为：

色谱柱采用阴离子交换手性色谱柱；

流动相由组分A、B、C组成；

所述组分A包括甲醇和/或乙腈；

所述组分B选自冰醋酸、丙酸、苯甲酸、苯乙酸或三氟乙酸；

所述组分C包括三乙胺和/或二乙胺。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，包括：

S1)对照品溶液及供试品溶液的制备：称取叶酸对映异构体对照品，用28.6g/L碳酸钠溶液溶解，并采用0-80％甲醇定容成一定浓度的对照品溶液；

称取叶酸供试品，用28.6g/L碳酸钠溶液溶解，并采用0-80％甲醇定容得到供试品溶液；

S2)色谱条件：

色谱柱采用阴离子交换手性色谱柱；

流动相由组分A、B、C组成；

所述组分A包括甲醇和/或乙腈；

所述组分B选自冰醋酸、丙酸、苯甲酸、苯乙酸或三氟乙酸；

所述组分C包括三乙胺和/或二乙胺；

S3)测定方法：

将所述的对照品溶液及供试品溶液按照所述的色谱条件依次进样，记录色谱图，根据对照品溶液的峰位置定位供试品溶液中叶酸对映异构体的峰位置，按照面积归一化法计算供试品中叶酸对映异构体的含量。

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述组分A、B、C的体积比为(100～98)：(1.2～0.8)：(1.2～0.8)。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述组分A、B、C的体积比为100:1:1。

5.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述甲醇和乙腈的体积比为(100～50)：(0～50)；

所述三乙胺和二乙胺的体积比为(100～0)：(0～100)。

6.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，检测波长为260～300nm；

流动相流速为0.8～1.2ml/min；

柱温为20～40℃；

进样量为5～20μl。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，检测波长为280nm；

流动相流速为1.0ml/min；

柱温为30℃；

进样量为20μl。

8.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱为大赛璐CHIRALPAKQN-AX离子交换柱。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，待测样品经过预处理：

采用28.6g/L的碳酸钠溶液，使待测样品溶解，然后用0-80％甲醇稀释，制成浓度为0.2mg/ml～1.0mg/ml的待测溶液。