[发明专利]一种富集稀有皂苷的西洋参提取物及其在抗白血病的应用

权利要求书

1.一种富集稀有皂苷的西洋参提取物，其特征在于，通过如下方法制备得到：

(1)提取：取西洋参切段，以含水乙醇或含乙醇水进行提取，所得提取液浓缩至80℃时的相对密度为0.8～1.3，记为A液。

(2)A液采用醇沉或者水沉的方法进行处理，分离得到的上清液浓缩至浓缩液生药比达1：0.25～3，记为B液。

(3)层析：

3.1第一次分离：取B液，将其配制成生药含量为0.2～1.5g/ml的药液，加入氢氧化钠，使药液中的氢氧化钠浓度达0.5～2.0mol·L^-1，充分搅拌，静置0.5～3小时或不静置，离心或滤过，得透明液，记为C液；取C液，上大孔吸附树脂柱；依次用碱液、水洗涤，用10～40V/V％的乙醇洗涤，40～80V/V％的乙醇洗脱，收集过柱液，记为D液；取D液，减压回收乙醇，残液常压浓缩至流浸膏状，记为甲。

3.2第二次分离：取甲，将其按0.01～1.0g/ml的浓度溶解到纯水，记为E液；或取甲用10％～35V/V％乙醇溶解，将其配制成生药浓度为0.05～1.0g/ml的溶液，记为E液；取E液，上大孔吸附树脂柱，用10～40V/V％的乙醇梯度洗涤，再用40～80V/V％乙醇洗脱，收集过柱液，记为F液；取F液，减压回收乙醇，残液浓缩至流浸膏状，干燥，获得第二次分离干燥物，即西洋参提取物。

2.如权利要求1所述富集稀有皂苷的西洋参提取物，其特征在于，步骤3.1中，取C液，上大孔吸附树脂柱，依次用碱液、水洗涤，用10～40V/V％的乙醇洗涤，40～80V/V％的乙醇梯度洗脱，收集过柱液，记为D液；具体为：

3.1.1上柱：取C液，上大孔吸附树脂柱，流量0.1～4.0SV，直至C液全部进入大孔吸附树脂柱内，静置1～60分钟或不静置。

3.1.2碱洗涤：用0.1～1.5mol·L^-1氢氧化钠溶液洗涤，流量均为0.1～4.0SV，弃去过柱液。

3.1.3水洗涤：用水洗涤至过柱液呈中性，流量0.1～4.0SV，弃去过柱液。

3.1.4醇洗涤：用10～40V/V％的乙醇洗涤，流量均为0.1～4.0SV，弃去过柱液。

3.1.5醇洗脱：用40～80V/V％的乙醇洗脱，流量均为0.1～4.0SV，收集过柱液，记为D液。

3.如权利要求1所述富集稀有皂苷的西洋参提取物，其特征在于，步骤3.2中，取E液，上大孔吸附树脂柱，用10～40V/V％的乙醇梯度洗涤，再用40～80V/V％乙醇洗脱，收集过柱液，记为F液；具体为：

3.2.1上柱：取E液，上大孔吸附树脂柱，流量0.1～4.0SV，直至E液全部进入大孔吸附树脂柱内，静置1～60分钟或不静置，待用。

3.2.2醇洗涤：用10～40V/V％的乙醇梯度洗涤，流量均为0.1～4.0SV，过柱液弃去。

3.2.3醇洗脱：用40～80V/V％乙醇洗脱，流量均为0.1～4.0SV，收集过柱液，记为F液。

4.如权利要求1所述富集稀有皂苷的西洋参提取物，其特征在于，步骤(2)中：

醇沉具体为：取A液，加入乙醇至含醇量达40～85V/V％，静置醇沉，然后取醇沉后的上清液，减压回收乙醇后继续浓缩至浓缩液生药比为1：0.25～3，记为B液。

水沉具体为：取A液，加入相当于A液体积2～5倍的水，静置水沉，然后取水沉后的上清液，浓缩至浓缩液生药比1：0.25～3，记为B液。

5.如权利要求1所述富集稀有皂苷的西洋参提取物，其特征在于，所述大孔吸附树脂柱为弱极性或非极性。

6.如权利要求3所述富集稀有皂苷的西洋参提取物，其特征在于，所述大孔吸附树脂柱选自D₁₀₁、DA₂₀₁、D₁₀₁+DA₂₀₁、PHD-100、PHD-200。

7.如权利要求1所述富集稀有皂苷的西洋参提取物，其特征在于，采用径高比为1：2～1：15的大孔吸附树脂柱。