[发明专利]细胞容纳容器及其生产方法

说明书

本发明的名称为细胞容纳容器及其生产方法。提供了包括神经细胞和培养基的细胞容纳容器，其中神经细胞粘着于细胞容纳容器的培养表面，神经细胞与培养表面之间的粘着面积为0.5mm²以上/80,000个神经细胞，并且培养基中葡萄糖的浓度为1g/L以上。

背景技术

技术领域

本发明涉及细胞容纳容器及其生产方法。基于2020年3月30日提交的日本专利申请号2020-061251和2021年1月26日提交的日本专利申请号2021-010564(其内容通过引用并入本文)要求优先权。

相关技术的描述

神经细胞的动作电位可以用于评估相对于神经细胞的功效或毒性。作为用于检测和评估神经细胞的动作电位的方法之一，使用微电极阵列(Microelectrode Array)(MEA)的评估方法是已知的。MEA是放置在培养细胞的基底上的微小电极的阵列，并且可以检测细胞的电活性。

然而，已知当在MEA上培养源自人iPS细胞的神经细胞并检测动作电位时，需要比在使用源自人以外的动物的神经细胞的情况下以更高的密度培养神经细胞并持续更长的时间段。

发明内容

发明人已发现，当长时间以高密度培养源自iPS的神经细胞时，细胞可能聚集并从培养容器的培养表面分离。

例如，专利文献1(日本未审查专利申请，第一公开号2018-117567)描述了细胞培养装置，其目的在于适当地保持和稳定活细胞的培养环境。细胞培养装置包括用于培养活细胞的培养槽(culture tank)、联机(online)/在线(in-line)监测装置、具有无菌采样装置的细胞状态确定装置、分析器、数据收集装置、数据分析器和聚类分析功能装置(clusteranalysis function)和具有针对每个聚类的细胞反应模型的参考功能的操作控制补偿器(operation control compensator)等。然而，专利文献1没有描述在长时间以高密度培养神经细胞的情况下神经细胞聚集，也没有描述抑制神经细胞的这种聚集必需的具体参数。

本发明的目的是提供用于抑制神经细胞聚集的技术。

根据本发明的细胞容纳容器包括：神经细胞；和培养基，其中神经细胞粘着于细胞容纳容器的培养表面，神经细胞与培养表面之间的粘着面积为0.949至28.2mm²/80,000个神经细胞，并且培养基中葡萄糖的浓度为1g/L以上。

根据本发明的用于生产细胞容纳容器的方法包括以下步骤：在培养条件下培育包括神经细胞和培养基的容器，同时在预定时间更换培养基，其中培养基中葡萄糖的浓度在1g/L以上保持预定的时间段。

根据本发明，可以提供用于抑制神经细胞聚集的技术。

附图说明

图1是显示实验实施例1中的神经细胞培养基中葡萄糖浓度随时间变化的测量结果的图。

图2A至2C显示了实验实施例2中通过从接种神经细胞第53天(DIV53)对神经细胞进行成像获得的代表性显微照片。

图3A显示了在实验实施例3中被评估为聚集水平1的神经细胞的代表性显微照片。图3B显示了在实验实施例3中被评估为聚集水平2的神经细胞的代表性显微照片。图3C显示了在实验实施例3中被评估为聚集水平3的神经细胞的代表性显微照片。图3D显示了在实验实施例3中被评估为聚集水平4的神经细胞的代表性显微照片。

图4是显示实验实施例4中神经细胞的聚集水平随时间变化的图。

图5是显示在实验实施例5中通过检查的培养基中葡萄糖浓度与神经细胞的聚集水平之间的关系获得的结果的图。

具体实施方式

[细胞容纳容器]