[发明专利]新型冠状病毒的重组S蛋白及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种新型冠状病毒的重组S蛋白及其制备方法和应用，所述重组S蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明基于Corona S1结构域进一步筛选得到IgG和IgM抗体激活表位多肽，并利用串联多肽组装成如SEQ IDNO:1所示的重组S蛋白。将该重组S蛋白应用于检测新型冠状病毒IgG和IgM抗体，可以有效降低新型冠状病毒诊断假阳性率，提高检测的准确度。

技术领域

本发明涉及分子生物技术领域，特别是涉及一种新型冠状病毒的重组S蛋白及其制备方法和应用。

背景技术

新型冠状病毒肺炎是一种急性感染性肺炎，其病原体是一种先前未在人类中发现的新型冠状病毒，即2019新型冠状病毒。2020年2月7日，国家卫健委决定将“新型冠状病毒感染的肺炎”暂命名为“新型冠状病毒肺炎”，简称“新冠肺炎”。2月11日，世界卫生组织(WHO)将其英文名称为Corona Virus Disease 2019(COVID-19)。2月22日，国家卫健委决定将“新型冠状病毒肺炎”英文名称修订为“COVID-19”，与世界卫生组织命名保持一致，中文名称保持不变。新型冠状病毒肺炎患者初始症状多为发热、乏力和干咳，并逐渐出现呼吸困难等严重表现。多数患者预后良好，部分严重病例可出现急性呼吸窘迫综合征或脓毒症休克，甚至死亡。目前，缺乏针对病原体的有效抗病毒药物，以隔离治疗、对症支持治疗为主。基于目前的流行病学调查，潜伏期1～14天，多为3～7天。传染源主要是新型冠状病毒感染的患者和无症状感染者。潜伏期具有传染性，无症状感染者也可能成为传染源，人群普遍易感。感染后或接种新型冠状病毒疫苗后可获得一定的免疫力，但持续时间尚不明确。经呼吸道飞沫和密切接触传播是主要的传播途径，接触病毒污染的物品也可造成感染。在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况下存在经气溶胶传播的可能。

既往已知感染人的冠状病毒有6种，即HCoV-229E、HCoV-OC43、SARSr-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1和MERSr-CoV。新型冠状病毒肺炎主要是由2019新型冠状病毒(2019-nCoV)感染引起，其属于β属的冠状病毒，其基因特征与SARSr-CoV和MERSr-CoV有明显区别。新型冠状病毒(Novel Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)是单股正链RNA病毒，具有极强的传染性和致死性。新型冠状病毒为球状病毒，主要包括4种结构蛋白，棘突蛋白(Spike protein，S)、膜糖蛋白(Membrane Protein，M)、小包膜糖蛋白(Envelop Protein，E)和核衣壳蛋白(nucleocapsid protein，N)，前三者在病毒衣壳表面散布存在。S蛋白和N蛋白是其中最重要的靶点蛋白，N蛋白是一种高度免疫原性的磷蛋白，在病毒体组装过程中，N蛋白与病毒RNA结合形成螺旋核衣壳，且与病毒基因组复制和调节细胞信号通路有关，因此N蛋白常作为冠状病毒诊断检测工具，是免疫学快速诊断试剂的核心原料。S蛋白承担病毒与宿主细胞膜受体结合及膜融合的功能，是宿主中和抗体重要作用位点以及疫苗设计的关键靶点。N蛋白是冠状病毒中含量最丰富蛋白，具有高度保守性。人或动物体在感染新型冠状病毒初期无明显症状(一般为4～7d)，但病毒表面的S蛋白和E蛋白已经可以刺激宿主体液免疫分泌IgM抗体，一周后分泌抗体则以IgG抗体为主。因此，膜表面抗原适合用于新型冠状病毒抗体血清检测。

临床上，新型冠状病毒需要与流感病毒、副流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒、人偏肺病毒、SARS冠状病毒等其他已知病毒性肺炎鉴别，与肺炎支原体、衣原体肺炎及细菌性肺炎等鉴别。此外，还要将SARS-CoV-2与非感染性疾病，如血管炎、皮肌炎和机化性肺炎等鉴别。而抗体检测是除了PCR检测之外，应对新型冠状病毒诊断最便捷的手段。

但是，采用一般抗原的新冠病毒抗体检测试剂盒的准确度不高，容易产生假阳性检测结果。

发明内容

基于此，有必要提供一种用于新冠病毒抗体检测假阳性率较低的新型冠状病毒的重组S蛋白。