[发明专利]一种靶向高尔基体pH响应的双光子诊疗前药及其制备

权利要求书

1.一种靶向高尔基体pH响应的双光子诊疗前药的制备方法，其特征在于，所述化合物结构如式Ⅰ所示：

式Ⅰ；

该方法的制备步骤如下：

（1）(a)将4-溴-1,8-萘酐，β-丙氨酸-Boc和DMAP溶于乙醇溶液中，将反应混合物搅拌并回流加热20-24小时，待冷却至室温，柱纯化得到白色固体化合物1；(b)将化合物1和对苯二胺溶解在乙二醇甲醚中，搅拌混合物并回流7-10小时，冷却至室温后，柱纯化得到黄色固体化合物2；

（2）(c)将化合物2与4-（2-N-Boc-肼基）苯甲酸溶解在无水乙醇溶液中，加入EDC·HCl和NHS后在室温下反应22-26小时，柱纯化得到固体化合物3；(d)将化合物3溶解在二氯甲烷中，添加TFA后在冰浴中搅拌30-40分钟，以除去Boc基团得到化合物4；(e)将盐酸DOX和化合物4溶于甲醇溶液中，加入三氟乙酸，将溶液在室温下避光搅拌22-26小时，浓缩后用乙腈结晶，通过离心分离红色固体，用甲醇-乙腈混合溶液洗涤，真空干燥后得到化合物5；

（3）(f)将化合物5添加至TFA和DCM的混合溶液中，搅拌2-4小时后加入乙醚，将沉淀过滤并用乙醚洗涤，得到化合物6；(g)在氮气保护下，将化合物6溶解在二甲基甲酰胺中，滴加三乙胺，加入DCC和DMAP后，将混合物搅拌10-20分钟后，加入L-半胱氨酸，将混合物搅拌20-24小时，柱纯化得到化合物NGD

。

2.根据权利要求1所述的一种靶向高尔基体pH响应的双光子诊疗前药的制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）(a)中4-溴-1,8-萘酐，β-丙氨酸-Boc和DMAP摩尔比范围为1：（1～1.5）：（1～1.5）；4-溴-1,8-萘酐溶于无水乙醇溶液的摩尔浓度范围为0.2～0.5 mol·L^-1；(b)中化合物1和对苯二胺摩尔比范围为1：（9～10）；化合物1溶于乙二醇甲醚的摩尔浓度范围为0.1～0.15 mol·L^-1；柱纯化中二氯甲烷和乙醇体积比为（20～10）：1。

3.根据权利要求1所述的一种靶向高尔基体pH响应的双光子诊疗前药的制备方法，其特征在于：所述的步骤（2）(c)中化合物2与4-（2-N-Boc-肼基）苯甲酸摩尔比范围为1：（1～1.5）；EDC·HCl和NHS摩尔比范围为1：（0.4～0.6）；(d)中化合物3溶于二氯甲烷的摩尔浓度范围为0.0075～0.01 mol·L^-1；(e)中盐酸DOX和化合物4摩尔比范围为1：（3～3.2）；化合物4溶于甲醇的摩尔浓度范围为0.015～0.02 mol·L^-1；三氟乙酸体积为0.5～1 mL；甲醇和乙腈体积比为1：（8～12）。

4.根据权利要求1所述的一种靶向高尔基体pH响应的双光子诊疗前药的制备方法，其特征在于：所述的步骤（3）(f)中化合物5溶于TFA和DCM混合溶液的摩尔浓度范围为0.1～0.15 mol·L^-1；TFA和DCM积比为1：（1～1.5）；(g)中化合物6和L-半胱氨酸摩尔比范围为1：（1～1.5）；化合物6溶于二甲基甲酰胺的摩尔浓度范围为0.05～0.08 mol·L^-1；三乙胺体积为1～1.5 mL；柱纯化中乙酸乙酯和乙醇体积比为（10～5）：1。