[发明专利]一种碳量子点荧光淬灭免疫层析试纸条的制备及应用

权利要求书

1.一种碳量子点荧光淬灭免疫层析试纸条的制备，其特征在于，包括以下步骤：

(1)通过微波合成法以柠檬酸和硫脲为原料制备绿色荧光碳量子点；

(2)将碳量子点通过活化酯法与鸡卵白蛋白偶联制备荧光供体探针；

(3)将待测物抗体吸附于金纳米颗粒表面制备荧光受体探针；

(4)按顺序依次将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫粘贴于PVC背板上；所述的硝酸纤维素膜上分别包被有荧光供体探针-待测物抗原混合物构成的检测线和荧光供体探针构成的质控线；将荧光受体探针与待测样品混合后滴加于样品垫，通过毛细管作用向吸水垫层析，待测物抗原与待测物竞争结合荧光受体探针，365nm紫外灯照射观察检测线处荧光强度。

2.根据权利要求1所述的一种碳量子点荧光淬灭免疫层析试纸条的制备，其特征在于，步骤(1)所述碳量子点的制备方法为：在搅拌下将5g柠檬酸和7g硫脲添加到25mL水中，不断搅拌后，将混合物置于家用微波炉，800瓦7分钟，直到溶液从无色变为深棕色为止，表明反应物发生了碳化，冷却至室温后，添加25mL水以溶解产物。

3.根据权利要求1所述的一种碳量子点荧光淬灭免疫层析试纸条的制备，其特征在于，步骤(2)所述荧光供体探针的制备方法为：取1mg碳量子点溶于1mL MES缓冲液中，向其中加入100μL 10mg/mL EDC溶液及50μL 10mg/mL鸡卵白蛋白溶液，室温下避光震荡4h后通过10KD超滤膜超滤离心去除未结合碳量子点。

4.根据权利要求1所述的一种碳量子点荧光淬灭免疫层析试纸条的制备，其特征在于，步骤(3)所述荧光受体探针的制备包括如下步骤：

(1)取800μL 25μg/mL金纳米颗粒溶液，向其中添加6μL 0.2M K₂CO₃溶液及4μL 0.65mg/mL待测物抗体加入到上述溶液中混合均匀，室温下静置1h；

(2)向其中加入16μL 20％BSA及8μL 10％PEG-20000，混匀后室温下静置30min；

(3)将安道管配平，4℃条件下，8000rpm离心40min，弃去上清，溶液复溶至80μL0.5％BSA，0.5％PVP，1％Tween 20及0.5％PEG₂₀₀混合液中待用。

5.权利要求1所述一种碳量子点荧光淬灭免疫层析试纸条的制备得到的试纸条，包括样品垫、结合垫、包被荧光供体探针-待测物抗原混合物的硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背板，其特征在于，在PVC背板上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；所述的硝酸纤维素膜上分别包被有由荧光供体探针-待测物抗原混合物构成的检测线和荧光供体探针构成的质控线，两条线间隔距离为4-6mm；样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫各交叠区的长度分别为0.8-1.3mm，试纸条宽3.0-4.0mm；样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫各交叠区的长度分别为1mm。

6.权利要求1所述一种碳量子点荧光淬灭免疫层析试纸条的制备得到的试纸条，用于检测食品中小分子物质。