[发明专利]一种能够快速有效从含粉尘的细胞悬液中分离细胞的方法在审
| 申请号： | 202110251664.5 | 申请日： | 2021-03-08 |
| 公开（公告）号： | CN113355273A | 公开（公告）日： | 2021-09-07 |
| 发明（设计）人： | 王文洋;袁亮;穆敏;陶欣荣;胡东;张荣波 | 申请（专利权）人： | 安徽理工大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N5/078;C12N5/0786;C12N5/0787 |
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| 地址： | 232001 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 能够 快速 有效 粉尘 细胞 悬液中 分离 方法 | ||
1.一种能够快速有效从含粉尘的细胞悬液中分离细胞的方法，其特征在于：该分离方法主要包括使用两种分离液从含粉尘的细胞悬液中分离细胞，用于进行后续的实验；首先，使用两种不同密度的细胞分离液，包括密度在1.077±0.001g/mL的淋巴细胞分离液(Ficoll)和1.30g/mL细胞分离液(Percoll)；其次这种方法可以分离多种经粉尘染毒的细胞悬液，包括小鼠肺组织、脾脏组织、肺泡灌洗液等单个核细胞悬液，也可以分离各种经粉尘染毒的细胞株；再次，这种方法经过验证，可以分离的粉尘类型包括直径小于0.05μm的煤尘、二氧化硅、以及不同浓度配比的二氧化硅和煤颗粒的混悬液，粉尘工作液浓度可以从50μg/mL-2000μg/mL；通过此方法分离的细胞损失少、回收细胞活力好，便于进行下次进一步的细胞实验。
2.根据权利要求1所述的一种能够快速有效从含粉尘的细胞悬液中分离细胞的方法，其特征在于：使用淋巴细胞分离液(Ficoll)可以从含粉尘的细胞悬液中分离单个核细胞，用于后期淋巴细胞、巨噬细胞等相关实验。
3.根据权利要求1所述的一种能够快速有效从含粉尘的细胞悬液中分离细胞的方法，其特征在于：使用不同浓度的细胞分离液(Percoll)可以从含粉尘的细胞悬液中分离多个核细胞及各种细胞株，例如中性粒细胞及各种类型的白细胞，还可以分离相应的细胞株，例如肺癌细胞株A549，小鼠巨噬细胞RAW264.7等。
4.根据权利要求1所述的一种能够快速有效从含粉尘的细胞悬液中分离细胞的方法，其特征在于：这种方法可以分离的粉尘类型包括直径小于5μm的煤尘、二氧化硅、以及不同浓度配比的二氧化硅和煤颗粒的混悬液，粉尘工作液浓度可以从50μg/mL-2000μg/mL。
5.根据权利要求1所述的一种能够快速有效从含粉尘的细胞悬液中分离细胞的方法，其特征在于：此分离方法细胞回收率较高、对细胞损伤较小、细胞活性好，适用于后续的实验操作。
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