[发明专利]唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用

说明书

本发明公开了唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用。具体制备工艺为：提取、微孔树脂柱粗分、在线自由基抑制剂组分筛选、反相中压色谱柱分离、在线自由基抑制剂筛选及亲水高压制备柱制备六个步骤。上述方法制得的自由基抑制剂可在制备自由基抑制药物中应用，具体作为有效成分按药学上可接受的任何载体制成各类药用制剂。本发明制备工艺中的提取溶剂、微孔树脂柱、反相中压色谱柱、亲水制备柱分离溶剂及分离材料均可回收利用；原料来源广泛，甲醇室温冷浸提取、纯化中使用的亲水制备液相色谱等工艺步骤均可实现规模化操作，且高压制备色谱分离可以保证产品的纯度大于95%。

技术领域

本发明涉及唐古特虎耳草中新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂分离技术领域，具体涉及唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用。

背景技术

唐古特虎耳草（Saxifraga tangutica Engl.），别名甘青虎耳草，是虎耳草科（Saxifragaceae）虎耳草属（Saxifraga）的一年生常绿草本植物，藏药名：“松吉蒂”，中药中称之为“迭达”，主要分布在青海、甘肃、西藏、四川以及及不丹与克什米尔地区海拔2900~4900米的针叶林灌丛下。唐古特虎耳草为常用藏药，可全草入药，《中药辞海》记载：其性味微苦、辛、寒。主要功效：清肝利胆，补脾健胃。主治：肝炎，胆囊炎，流行性感冒。现代药理学研究证明酚类是主要活性成分。文献报道，酚类化合物具有良好的清除自由基活性。但目前，仅有本课题发表的8个抗氧化的酚类化合物从唐古特虎耳草中被分离并鉴定（JunDang, Yanduo Tao, Yun Shao, et al. Antioxidative extracts and phenolsisolated from Qinghai-Tibet Plateau medicinal plant Saxifraga tangutica Engl.Industrial Crops and Products, 2015, 78: 13-18）。为了进一步加快唐古特虎耳草的质量评价、生产销售及相关新药的研发步伐，有必要从中挖掘更多的结构新颖的活性成分。

目前，仅有一项本课题组申请的国家发明专利（申请号：202010041021.3）描述了唐古特虎耳草中六种结构已知的没食子酰基类天然自由基清除剂的分离制备工艺及其应用。并未有新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的文献或专利报道。因此，亟需建立一种工艺简单、规模化从唐古特虎耳草中分离制备自由基抑制剂的方法。

发明内容

基于上述技术问题，本发明的目的是提供唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用。

本发明保护唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂，其中，该杜鹃素糖苷类自由基抑制剂呈白色粉末状，其名称为杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂，其分子式为C₂₂H₃₄O₁₂，其化学结构式为：

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本发明还保护唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的分离制备工艺，具体包括如下步骤：

步骤1，提取：将唐古特虎耳草全草阴干，粗碎后按料液比1g：5~100mL的甲醇提取，在室温下提取2~4次，每次2~4 h，过滤、合并滤液，即滤液A，该滤液A按聚酰胺的量：唐古特虎耳草药材的量=1:5拌样并减压干燥，即得唐古特虎耳草提取物拌样样品；