[发明专利]一种诱导型碱基编辑系统及其应用有效
申请号: | 202110249394.4 | 申请日: | 2021-03-08 |
公开(公告)号: | CN112877314B | 公开(公告)日: | 2023-06-13 |
发明(设计)人: | 姚少华;龙洁 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | C12N9/78 | 分类号: | C12N9/78;C12N9/22;C12N15/113 |
代理公司: | 北京正华智诚专利代理事务所(普通合伙) 11870 | 代理人: | 代维凡 |
地址: | 610041 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 诱导 碱基 编辑 系统 及其 应用 | ||
1.一种诱导型碱基编辑系统,其特征在于,所述碱基编辑系统包括碱基编辑器,以及与其结合的雷帕霉素;所述碱基编辑器包括拆分的脱氨酶;所述脱氨酶为序列长度为199个氨基酸的人胞嘧啶脱氨酶APOBEC3A;
所述人胞嘧啶脱氨酶APOBEC3A在第85位氨基酸位点被拆分,拆分位点的N端和C端分别与FRB和FKBP蛋白融合,FRB和FKBP能够在雷帕霉素的诱导下二聚化形成异二聚体,从而组装得到有活性的人胞嘧啶脱氨酶APOBEC3A。
2.根据权利要求1所述的诱导型碱基编辑系统,其特征在于,所述FRB和FKBP分别与脱氨酶氨基酸拆分位点的非结构性环的分裂处偶联。
3.根据权利要求1所述的诱导型碱基编辑系统,其特征在于,其中的脱氨酶替换为序列长度为229个氨基酸的大鼠胞嘧啶脱氨酶APOBEC1;所述大鼠胞嘧啶脱氨酶APOBEC1在第77位氨基酸位点被拆分。
4.根据权利要求1所述的诱导型碱基编辑系统,其特征在于,所述雷帕霉素的浓度为0.01~200nM。
5.权利要求1~4任一项所述的诱导型碱基编辑系统在基因编辑中的应用。
6.一种用于进行基因编辑的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1~4任一项所述的诱导型碱基编辑系统。
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