[发明专利]一种超灵敏无标记快速检测蓖麻毒素的光子晶体传感材料及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种无标记快速检测蓖麻毒素的方法，包括以下步骤：向光子晶体传感材料中加入缓冲液，将光纤光谱仪探头垂直固定，待光子晶体传感材料衍射峰稳定后，用光纤光谱仪记录衍射峰的强度和位置，向稳定的传感体系中加入含蓖麻毒素的待测样品，30分钟后用光纤光谱仪记录其衍射光谱，根据衍射光谱的衍射峰值计算待测样品中蓖麻毒素的含量，所述光子晶体传感材料为连接有H₁序列的蛋白石SiO₂-AuNPs光子晶体，所述蛋白石SiO₂-AuNPs光子晶体由修饰金纳米颗粒的二氧化硅微球悬浮液经重力垂直沉降自组装堆垒形成，所述H₁序列为：

5'-SH C6-GAC CTA CTT ATG AAA AAA AAA AAA TTA TAT CTA TCT-3'；

所述方法包括以下步骤：

S1. 利用Duff's法合成金纳米颗粒

将去离子水、NaOH溶液和四羟甲基氯化磷混合均匀，然后快速加入四氯金酸溶液，在室温条件下避光搅拌进行反应，反应完成后将反应液避光保存；

S2. SiO₂-AuNPs微球的制备

将氨基化二氧化硅微球的水相悬浮液和金纳米颗粒水溶液混合，超声使溶液混合均匀，在室温条件下避光搅拌进行反应，将所得产物多次离心重悬，以除去未修饰在微球上的金纳米颗粒，最后，将深酒红色沉淀超声分散于去离子水中，以获得SiO₂-AuNPs悬浮液；

S3. 基于巯基化的H₁序列光子晶体传感材料的制备

将1% SiO₂-AuNPs悬浮液加入聚苯乙烯24孔板中，每孔600μL，并置于60℃的真空干燥箱中干燥24小时，通过微球的重力沉降自组装获得堆垒在24孔板底部的光子晶体，将10μM修饰巯基的H₁序列在95℃的金属浴中加热5分钟，然后逐渐恢复至室温，使用PBS缓冲液将寡核苷酸序列稀释，将50μL 10μM H₁序列滴加在24孔板SiO₂-AuNPs光子晶体，在恒温培养箱中以37℃孵育12小时，通过Au-S键在光子晶体上修饰H₁序列，制备得到H₁寡核苷酸序列修饰的光子晶体传感材料。

2.根据权利要求1所述的无标记快速检测蓖麻毒素的方法，其中，该方法还包括预先建立检测蓖麻毒素的标准曲线：向权利要求1所述的光子晶体传感材料中加入缓冲液，将光纤光谱仪探头垂直固定，待光子晶体传感材料衍射峰稳定后，用光纤光谱仪记录衍射峰的强度和位置，向稳定的传感体系中加入一系列不同浓度的蓖麻毒素标准溶液，30分钟后用光纤光谱仪记录其衍射光谱，根据衍射光谱的衍射峰值和对应浓度建立标准曲线。