[发明专利]一种检测全血中免疫抑制剂药物的方法

权利要求书

1.一种检测全血中免疫抑制剂药物的方法，所述免疫抑制药物为依维莫司和西罗莫司，其特征在于，所述方法包括对全血样品进行提取后采用HPLC-MS法检测分析，其中，提取液为三氟醋酸和氟化铵的甲酸溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，提取液中三氟醋酸体积分数为0.01-0.05％，氟化铵的浓度为0.1-0.5mM。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取方法包括：使用提取液对全血进行提取后涡旋离心取上清液氮吹浓缩至吹干，然后加入复溶液进行复溶。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述复溶液为含有三氟醋酸和氟化铵的甲醇/水混合溶液。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，复溶液中水与甲醇的体积比为7:7-7:1；

优选地，复溶液中三氟醋酸体积分数为0.01-0.05％，氟化铵的浓度为0.1-0.5mM。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，HPLC-MS分析时，流动相A为含有三氟醋酸和氟化铵的HPLC级水，流动相B为含有三氟醋酸和氟化铵的甲醇。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，流动相A和B中含有的三氟醋酸的体积分数为0.01-0.05％，氟化铵的浓度为0.1-0.5mM。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，色谱条件为：

色谱柱：ZORBAX SB C18(2.1mm×50mm,3.5μm)；

柱温：40-70℃；

流动相A：0.025％三氟醋酸和0.4mM氟化铵的HPLC级水，流动相B：0.025％三氟醋酸和0.4mM氟化铵的甲醇；

梯度洗脱条件：0-1.0min，2％流动相B；1.0-1.1min，2％-98％流动相B；1.1-3.5min，98％流动相B；3.5-3.6min，98％-2％流动相B；3.6-5min，2％流动相B。

流速：0.2-0.5mL/min；

进样量2-8uL。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，质谱条件：采用正离子电喷雾离子化的多离子反应监测模式，喷雾电压4000V：去溶剂温度：315℃，采用MRM模式采集数据；

优选地，分析物依维莫司的母离子为975.512m/z，子离子为908.333m/z，透镜电压为203V，碰撞能量为15.12V；

分析物西罗莫司的母离子为931.462m/z，子离子为864.375m/z，透镜电压为180V，碰撞能量为18.95V。

10.一种检测全血中免疫抑制剂药物的试剂盒，所述免疫抑制药物为依维莫司和西罗莫司，其特征在于，包括提取液、复溶液和流动相溶液；

所述提取液为三氟醋酸和氟化铵的甲酸溶液；优选地，提取液中三氟醋酸体积分数为0.01-0.05％，氟化铵的浓度为0.1-0.5mM；

所述复溶液为含有三氟醋酸和氟化铵的甲醇/水混合溶液；优选地，复溶液中水与甲醇的体积比为7:7-7:1；优选地，复溶液中三氟醋酸体积分数为0.01-0.05％，氟化铵的浓度为0.1-0.5mM；

所述流动相溶液为：流动相A为含有三氟醋酸和氟化铵的HPLC级水，流动相B为含有三氟醋酸和氟化铵的甲醇；优选地，流动相A和B中含有的三氟醋酸的体积分数为0.01-0.05％，氟化铵的浓度为0.1-0.5mM。