[发明专利]一种分离纯化微孢子虫极管的方法有效
申请号: | 202110236616.9 | 申请日: | 2021-03-03 |
公开(公告)号: | CN112980693B | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
发明(设计)人: | 龙梦娴;潘国庆;吕青 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12N1/06 | 分类号: | C12N1/06;C12N1/10;C12R1/90 |
代理公司: | 重庆航图知识产权代理事务所(普通合伙) 50247 | 代理人: | 王贵君 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 分离 纯化 孢子 虫极管 方法 | ||
1.一种分离纯化家蚕微孢子虫极管的方法,其特征在于,具体步骤如下:
a)家蚕微孢子虫体外发芽,震荡破碎,使孢壳与极管分离;所述破碎为生物样品均质仪震荡破碎,震荡破碎的条件为:震荡速度6m/s,循环次数6,运行时间20s,间隙时间10s;震荡破碎还包括加入等质量直径为425-600μm的大玻璃珠和直径为150-212μm的小玻璃珠;
b)将步骤a)得到的样品按500-6000rpm进行差速离心,收集3500rpm-6000rpm之间的沉淀样品即为纯化的极管;差速离心的转速按500rpm递增,差速离心的离心时间为5min。
2.根据权利要求1所述的分离纯化家蚕微孢子虫极管的方法,其特征在于,步骤a)中,所述体外发芽使用的方法为于0.1M的KOH溶液中,30℃萌发40min。
3.根据权利要求1所述的分离纯化家蚕微孢子虫极管的方法,其特征在于,步骤a)中,所述家蚕微孢子虫体外发芽步骤中加入的孢子的浓度大于108个/mL。
4.根据权利要求1所述的分离纯化家蚕微孢子虫极管的方法,其特征在于,步骤a)中,所述家蚕微孢子虫体外发芽步骤中加入的孢子的浓度大于109个/mL。
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