[发明专利]一种细胞色素P450单加氧酶突变体及其应用有效
| 申请号： | 202110230094.1 | 申请日： | 2021-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN112961844B | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 石金田;许国超;贾煊杰;倪晔;郑香玉 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12P33/00;C12P33/06;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 王玉仙 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 色素 p450 单加氧酶 突变体 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种细胞色素P450单加氧酶突变体，其特征在于，所述的细胞色素P450单加氧酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种编码权利要求1所述的细胞色素P450单加氧酶突变体的基因。
3.一种携带权利要求2所述的基因的表达载体。
4.一种表达权利要求1所述的细胞色素P450单加氧酶突变体的重组菌。
5.权利要求1所述的细胞色素P450单加氧酶突变体在催化石胆酸氧化合成熊去氧胆酸中的应用，其特征在于，具体包括：在缓冲液中，在所述细胞色素P450单加氧酶突变体的催化下，利用石胆酸进行氧化反应，形成熊去氧胆酸。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的缓冲液为磷酸盐浓度为0.1～0.2mol/L的磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的氧化反应的温度为25～35℃；反应时间为2～24小时。
8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的石胆酸的浓度为1～500mmol/L。
9.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的细胞色素P450单加氧酶突变体的用量为1～100kU/L。
10.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的细胞色素P450单加氧酶突变体的添加形式为含有细胞色素P450单加氧酶突变体的粗酶液或冻干细胞。
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