[发明专利]一株产还原性脱卤素酶的菌株及其应用

权利要求书

1.一株产还原性脱卤素酶的菌株YtRDases-55，其特征在于所述菌株分类命名为假单胞菌Pseudomonas sp.，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.21296，保藏日期2020年12月4日。

2.利用权利要求1所述菌株催化制备2,3-二氯吡啶的方法，其特征在于所述方法具体如下：

1）菌株活化：挑取菌种划线接种至斜面培养基，于恒温培养箱30℃培养16～24h；

2）液体发酵：挑取一环斜面活化菌株接种于装有发酵培养基的培养容器中，转速200r/min、温度30℃，培养72h，8000r/min离心发酵液20min收集菌体细胞；

3）全细胞催化2,3,6-三氯吡啶制备2,3-二氯吡啶：将2,3,6-三氯吡啶加入体积比10%的甲醇水溶液中，2,3,6-三氯吡啶与甲醇水溶液的质量体积比为2g：1000ml-10g：1000ml，调pH至7.0，搅拌均匀，加入和甲醇水溶液等体积发酵液离心后收集的菌体进行反应，温度37～60℃，维持转速在50 r/min，反应3～10h。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的斜面培养基的成分及终浓度：葡萄糖1g/L、酵母浸粉5 g/L，蛋白胨10 g/L、NaCl 5 g/L和琼脂 20 g/L，调节含有上述成分溶液的pH为7.0，121℃高压蒸汽灭菌20min即得到所述的斜面培养基。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的发酵培养基的成分及终浓度：葡萄糖5-20 g/L、2,3,6-三氯吡啶0.5 g/L、(NH₄)₂SO₄ 1-5g/L、KH₂PO₄ 0.5-2g/L、MgSO₄ 0.2-0.5g/L、维生素B₁ 1mg/L、生物素50μg/L、烟酰胺1mg/L、泛酸钙 1mg/L、FeSO₄ 1.6 mg/L、CuSO₄ 94μg/L、ZnSO₄ 0.23mg/L、钼酸钠0.17mg/L、硼酸50μg/L和MnSO₄ 0.38 mg/L，调节含有上述成分溶液的pH为7.0-7.2，121℃高压蒸汽灭菌20min即得到所述的发酵培养基。