[发明专利]一种磁珠干化保护液、干化磁珠及其制备方法

说明书

本发明涉及生化试剂技术领域，具体涉及一种磁珠干化保护液、干化磁珠及其制备方法。其中所述磁珠干化保护液，以质量百分数计，所述组分包括5‑15％纤维二糖，0.005‑0.02％吐温20和0.05‑0.2％蔗糖酯，余量为水；所述蔗糖酯的HLB值为15。本发明提供的磁珠干化保护液，可以最大限度的保护干化羟基磁珠的性能，干化后的羟基磁珠可以室温保存和运输，保存期限长，有助于在微流控芯片中应用。

技术领域

本发明涉及生化试剂技术领域，具体涉及一种磁珠干化保护液、干化磁珠及其制备方法。

背景技术

核酸的分子生物学技术是进行病原微生物检测、物种鉴定、物种起源、多样性评估及其亲缘关系、系统进化等常用研究手段之一。能否提取出高质量的核酸则是分子生物学实验中的关键，提取方法的灵敏度、特异性也将直接关系到后续试验的成败。因此，核酸提取是分子生物学最关键的方法之一。

随着分子生物学的广泛应用，对核酸提取技术也提出了新的要求，高效、便捷、环保、大通量、自动化成为核酸提取技术发展的主流方向。从第1代化学法，如酚-氯仿法、Trizol法，到第2代吸附柱法，以及近年发展起来的第3代磁珠法，其提取技术和效率不断地改进优化。

羟基磁珠表面修饰大量的硅烷醇基团(羟基)，能在高盐低pH条件下和溶液中的核酸通过疏水作用、氢键作用和静电作用等发生特异性结合，而不与其他杂质(如蛋白)结合，迅速从生物样品中分离核酸，操作安全简单，非常适用于核酸的自动化和高通量提取。

然而市面上磁珠几乎都是在保存液中运输和使用，干燥会极大损害磁珠性能，但随着磁珠纯化方法的日渐普及，以及微流控设备的研发和进步，如何预置干化磁珠变得十分重要，因为设备和芯片的小型化，能够减少试剂仓单独储存磁珠能够降低芯片体积，而且，干化后磁珠可以预置在芯片的任意位置，因此可以极大地减轻微流控过程液体流动的复杂性，给予开发者更大的空间去研发和优化，提供更便捷的使用和控制。

中国发明专利申请CN109725148A公开了一种免疫磁珠保存液，含有缓冲液、情性蛋白质、甘油、水溶性糖、人工合成高分子聚合物、蛋白稳定剂、还原性物质、氨基酸、整合剂、血清、表面活性剂和防腐剂。该发明的免疫磁珠保存液，使免疫磁珠可以在4℃保存条件下一年内维持较高的活性，为免疫磁珠在实际检测中的应用提供了保障。

中国发明专利申请CN109725141A公开了一种链霉亲和素偶联磁珠(SA-磁珠)冻干工作液、SA-磁珠冻干品及冻干品的制备方法，所述冻干工作液适用于碱性磷酸酶发光体系，包括蛋白保护剂，所述蛋白保护剂为酪蛋白钠。所述冻干工作液还包括缓冲液，所述缓冲液为TBS缓冲液，所述TBS缓冲液的组分为10-50mM Tris-HC1，0.9％Nacl，pH:7.4，该发明的冻干工作液，包括了酪蛋白钠和TBS缓冲液，以使冻干工作液更适于碱性磷酸酶反应体系的SA-磁珠冻干品：SA-磁珠与冻干工作液的混合液以微液滴形式点样到芯片中再通过原位冻干后得到冻干品，冻干品复溶后能够保持很好的结合生物素的活性，与生物素化抗体、抗原及碱性磷酸醇标记抗体发生夹心反应后，对酶催化底物的活性影响小，发光值高而稳定。

中国发明专利申请CN108008125A公开了一种适用于免疫磁珠的冻干工作液，所述冻干工作液为冻干缓冲液、冻干保护剂和防腐剂的组合，所述冻干缓冲液、冻干保护剂与防腐剂的质量比为1-10:1-500:1；所述冻干缓冲液为三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、硼酸棚砂缓冲液中的一种或多种组合；所述冻干保护剂包括糖类物质和聚合物，所述糖类物质与聚合物的质量比为0.1-20:1。

以上保护液均为冻干保护液，需要冷冻干燥，用于免疫磁珠的保存，而羟基磁珠在冷冻、干燥和离心操作条件下均会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。

因此开发一种适合于羟基磁珠的干化保护液，成为一个急需解决的重要课题。

发明内容