[发明专利]一种从麦冬须根残渣中提取多糖并纯化的方法有效
| 申请号: | 202110217386.1 | 申请日: | 2021-02-26 |
| 公开(公告)号: | CN112830977B | 公开(公告)日: | 2022-05-17 |
| 发明(设计)人: | 黄毅;莫贵友;余兆慧;李沛霞;甘南湘;晋艳 | 申请(专利权)人: | 西南科技大学 |
| 主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
| 代理公司: | 北京棘龙知识产权代理有限公司 11740 | 代理人: | 谢静 |
| 地址: | 621010 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 麦冬 须根 残渣 提取 多糖 纯化 方法 | ||
1.一种从麦冬须根残渣中提取多糖并纯化的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一,将已提取完总黄酮和总皂苷的麦冬须根残渣处理成50目以下的干燥固体渣粉;
步骤二,在所述固体渣粉中加入水和生物酶混合均匀,所述生物酶的加入量占固体渣粉、水、生物酶总质量的1~2%,控制pH进行超声提取,所述超声提取的控制参数为:pH为5.0~6.0,超声功率为200~300W,时间为40~60min;提取完毕进行灭酶处理,之后过滤,获得粗多糖提取液;
步骤三,将所述粗多糖提取液进行醇沉处理,干燥后得到多糖固体粗品;
所述醇沉处理包括以下步骤:
(1)将所述多糖提取液加入硅藻土过滤后保留滤液;
(2)将所述滤液浓缩至原体积的1/5,加入无水乙醇于0~4℃搅拌20~24h;
(3)将混合液离心并清洗后保留沉淀,干燥得到多糖固体粗品;
步骤四,将所述多糖固体粗品用水溶解后进行微滤,保留滤液并采用离子交换柱进行杂质分离,具体控制过程为:采用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱,将粗多糖用纯水制得0.1g/mL样品溶液,过0.45μm微孔滤膜,开始洗脱前以pH值为5.5的48mmol/L乙酸钠缓冲液预平衡3个柱床体积;开始洗脱,先用pH值为5.5的48mmol/L乙酸钠溶液洗脱1个柱床体积,再以含1.0mol/LNaCl且pH值为5.0~6.0的48mmol/L乙酸钠缓冲液洗脱;其间采用蒽酮-硫酸法和紫外光度法在线检测多糖色谱峰及蛋白杂质峰,共得到四个主要色谱峰,按照顺序分别记为组分F1~F4,并收集得到4种多糖初分离液;
步骤五,将含有F1组分的多糖初分离液经水透析并冷冻干燥,获得的F1固体用纯水溶解后进行凝胶过滤柱层析分离,采用Sepharose CL-6B凝胶过滤柱,纯水洗脱,采用蒽酮-硫酸法在线检测,得到两个主要色谱峰,按照顺序分别记组分F1-1~F1-2,将分离出的含有F1-1组分的液体经冷冻干燥,即得多糖精制纯化品。
2.如权利要求1所述的一种从麦冬须根残渣中提取多糖并纯化的方法,其特征在于,所述固体渣粉和水的质量比为1:(30~40)。
3.如权利要求1或2所述的一种从麦冬须根残渣中提取多糖并纯化的方法,其特征在于,所述固体渣粉和水的质量比为1:35。
4.如权利要求1所述的一种从麦冬须根残渣中提取多糖并纯化的方法,其特征在于,所述生物酶的加入量占固体渣粉、水、生物酶总质量的1.36%。
5.如权利要求1所述的一种从麦冬须根残渣中提取多糖并纯化的方法,其特征在于,所述超声提取的控制参数为:pH为5.4~5.5,超声功率为200~300W,时间为48~50min。
6.一种麦冬多糖,其特征在于,是采用权利要求1~5任意一项所述的方法获得。
7.如权利要求6所述的一种麦冬多糖,其特征在于,所述麦冬多糖为分子量4000的α-D-果聚糖,以2→1连接的呋喃型果糖为主,支链为2→6连接。
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