[发明专利]微流控检测芯片及微流控检测方法

说明书

本发明涉及一种微流控检测芯片及微流控检测方法，所述微流控检测芯片包括包括至少一个检测单元，所述检测单元包括加样腔体、免疫结合池、免疫检测池、免疫清洗液池、免疫缓冲液池、核酸检测池和废液池。本发明的微流控检测芯片以微流控技术作为载体，将肿瘤标志物检测的免疫学检测方法和分子生物学检测方法结合于封闭的微流控芯片中，实现少量的样本同时完成不同类别肿瘤标志物的检测与分型，得出针对性的基于免疫及分子检测项目的测试结果，能够为临床判断提供更加细致、全面、多维度的数据，而且简化了流程和仪器设备的需求，缩短了检测周期，减少了交叉污染，也提高了检测结果的有效性和准确性。

技术领域

本发明涉及微流控技术领域，特别是涉及一种微流控检测芯片及微流控检测方法。

背景技术

肿瘤标志物检测的免疫学检测方法是以体液中的蛋白标志物作为抗原并与用酶、同位素、生物素和亲和素、荧光素等标记的抗体产生特异性结合而被定位和检测，常规的用于酶联免疫分析、化学发光免疫分析、放射免疫分析等。虽然已经发现了很多种蛋白标志物，但并不是所有的癌症都有蛋白标志物，也不是所有的蛋白标志物升高都是癌症引起的，某些非癌症的情况也会导致某些蛋白标志物升高。

此外，分子生物学检测方法(液体活检)已经持续应用于癌症病人的病程管理当中，近些年来，其应用潜力也得到了积极开发，它能够弥补免疫学检测方法的一些缺陷。液体活检通过采集患者血液、尿液等体液标本中的肿瘤相关产物，包括血液中游离的循环肿瘤细胞(CTC)、循环肿瘤DNA(ctDNA)和外泌体等，再结合肿瘤靶基因的分子生物学检测方法，实现高通量、高特异性和高敏感性检测结果，对血浆和其他体液中游离DNA(cfDNA)的检测分析已经成功鉴别到了多种癌症相关分子类型，包括基因突变、拷贝数变异、移位、甲基化变异、基因表达变异及病毒DNA等。

以上提及的肿瘤检测手段，无论是免疫学检测方法(蛋白标志物检测)还是分子生物学检测方法(液体活检)均有各自的优势，又具有很强的互补性，两者本质上是针对不同时间段、不同测试靶对象的诊断手段。将二者的检测结果结合，将能够得到更加全面、综合的针对不同肿瘤阶段的患者在免疫水平和分子水平上的动态数据和指标，能够为临床医生在实际诊断中提供更好的参考依据。但是以常规方式分别进行免疫学检测方法和分子生物学检测方法不仅流程复杂，而且需要分别独立使用多种仪器设备，存在大量繁琐的人工操作，检测周期长，设备间的样本转移也使得检测过程有极大的风险出现交叉污染，从而影响检测结果。

发明内容

基于此，有必要提供一种既能进行免疫学检测方法又能进行分子生物学检测方法的微流控检测芯片。

一种微流控检测芯片，包括至少一个检测单元，所述检测单元包括加样腔体、免疫结合池、免疫检测池、免疫清洗液池、免疫缓冲液池、核酸检测池和废液池；

所述加样腔体用于样本液的输入和存储；所述免疫结合池与所述加样腔体连接，所述免疫结合池用于预装包被有捕获抗体或捕获抗原的捕获载体；所述免疫检测池与所述免疫结合池连接，所述免疫检测池用于预装标记抗体；所述免疫清洗液池与所述免疫检测池连接，所述免疫清洗液池用于预装能够洗去所述标记抗体的清洗缓冲液；所述免疫缓冲液池与所述免疫检测池连接，所述免疫缓冲液池用于预装检测缓冲液；所述废液池与所述免疫检测池连接以用于收容废液；所述核酸检测池与所述加样腔体连接，所述核酸检测池用于预装能够扩增靶序列的PCR反应试剂；

所述微流控检测芯片具有旋转中心，所述免疫结合池、所述免疫检测池和所述废液池自所述旋转中心近心端至远心端依次分布，所述免疫清洗液池和所述免疫缓冲液池相对于所述免疫检测池更靠近所述旋转中心，所述核酸检测池相对于所述废液池更靠近所述旋转中心，所述免疫结合池、所述免疫检测池和所述废液池之间均设有阀门。