[发明专利]SARS-CoV-2检测试剂盒

权利要求书

1.SARS-CoV-2检测试剂盒，其特征在于，包括：

a）固相偶联物；

所述固相偶联物由固相载体及包被于所述固相载体上的抗原和抗体组成；

所述抗体为抗新冠病毒核衣壳N蛋白的单克隆抗体；

所述抗原包括：重组SARS-CoV-2的N蛋白，以及SARS-CoV-2 Spike蛋白的S1亚基、S2亚基、RBD、M蛋白及E蛋白；

b）标记有化学发光标记物的抗原，以及标记有化学发光标记物的抗体和/或抗抗体；

所述抗体为新冠病毒核衣壳N蛋白的单克隆抗体，但与a）中的抗体结合的抗原表位不同；

所述抗原包括：重组SARS-CoV-2的N蛋白，以及SARS-CoV-2 Spike蛋白的S1亚基、S2亚基、RBD、M蛋白及E蛋白；

所述抗抗体为抗人IgG二抗、抗人IgA二抗、抗人IgM二抗中的至少一种；

所述抗抗体为单克隆抗体或多克隆抗体；

其中，在a）和b）中，所述重组SARS-CoV-2的N蛋白不具有所述抗新冠病毒核衣壳N蛋白的单克隆抗体所识别的抗原表位；

所述试剂盒还包括抗原释放组分；

所述抗原释放组分包括：10 mM ~ 50 mM柠檬酸盐、0.5 mM ~ 2 mM有机酸、0.1 v/v%~2v/v %表面活性剂，pH=3 ~ 4.5；所述表面活性剂包含Tween；

所述有机酸包括乙酸、乙二酸、苹果酸、水杨酸中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述重组SARS-CoV-2的N蛋白通过化学修饰、氨基酸替换和截短突变中的任意一种的方式去除其中与a）和b）中所述抗新冠病毒核衣壳N蛋白的单克隆抗体所识别的抗原表位相同的表位。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为吖啶类化学发光物质。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂包含Tween-20、Tween-80、Tween-100中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述抗原释放组分还包含防腐剂。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，防腐剂的浓度为0.1 w/v % ~ 0.5 w/v%。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述固相载体为试管、EP管、多孔板、微量反应板凹孔、微珠或圆片。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述固相载体的材质为塑料、纤维素、交联葡聚糖、玻璃、硅橡胶和琼脂糖凝胶中的一种或多种。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述塑料包括聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚乙烯以及聚丙烯中的至少一种。

10.根据权利要求1~9任一项所述的试剂盒，其特征在于，在a）中，所述抗体为多种，分别针对N蛋白的不同表位。

11.根据权利要求1~9任一项所述的试剂盒，其特征在于，在b）中，所述抗体和/或抗抗体的种属来源与步骤a）中的所述抗体相同。

12.基于权利要求1~11任一项所述试剂盒的检测SARS-CoV-2的非诊断目的方法，其特征在于，包括：

i）将待检测样品进行处理以释放其中的SARS-CoV-2抗原及抗体，并将其与所述固相偶联物共孵育；

ii）洗去未结合的SARS-CoV-2抗原及抗体；

iii）加入所述标记有化学发光标记物的抗原，以及抗体和/或抗抗体，并对所述化学发光标记物的信号强度进行检测。