[发明专利]一种何首乌中二蒽酮类化合物的检测方法

说明书

本发明提供了一种何首乌中二蒽酮类化合物的检测方法，属于化学分析及检测技术领域。本发明以体积浓度为70％的乙醇对何首乌中的二蒽酮类化合物进行提取，提取效果率高；本发明采用内标法对何首乌中的二蒽酮类化合物进行检测，提高了检测灵敏度。另外，选择乙腈和质量浓度为0.1％的甲酸水溶液作为流动相，使何首乌中的二蒽酮类化合物具有很好的分离度，提高了检测灵敏度。本发明采用电喷雾阴离子串联质谱多反应检测(MRM)模式，快速在线优化包括碎裂电压以及碰撞能在内的质谱参数，使之形成高强度的靶向离子对，通过此系列特征性的靶向离子对，从而达到对何首乌药材中的二蒽酮类化合物的快速定性和定量分析。

技术领域

本发明涉及化学分析及检测技术领域，尤其涉及一种何首乌中二蒽酮类化合物的检测方法。

背景技术

何首乌为生熟异治的典型品种之一，分为生何首乌和制何首乌。生何首乌为蓼科植物何首乌属(Fallopia)何首乌(Polygonum multiflorum Thunb.)的干燥块根，具有解毒、消痈、截疟、润肠通便等功效，常用于治疗疮痈，风疹瘙痒，久疟体虚及肠燥便秘。制何首乌为何首乌的炮制加工品，具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨、化浊降脂等功效，常用于治疗血虚微黄、眩晕耳鸣、须发早白、腰膝酸软、肢体麻木及高血脂症等。

《本草汇言》记载何首乌：“生用气寒，性敛，有毒；制熟，气温无毒”。何首乌中化学成分种类较多，迄今已发现150多种化合物，主要为二苯乙烯类、蒽醌类、二蒽酮类、多酚类及萘类等化学成分。近年来，何首乌在临床上的肝毒性等不良反应报道，不断增多，一定程度上影响了何首乌的应用。研究发现，何首乌中二蒽酮类成分，具有一定的肝毒性，尤其反式-大黄素二蒽酮(trans-emodin dianthrones)和顺式-大黄素二蒽酮(cis-emodindianthrones)，在斑马鱼的胚胎发育和肝毒性评价模型中，均表现一定的毒性作用，提示该类成分可能为何首乌中潜在的肝毒性成分。

所以，有必要增加何首乌中二蒽酮类成分的限量标准。目前，有关采用超高效液相色谱-串联四级杆质谱联用技术测定何首乌中二蒽酮类成分的方法未见报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种何首乌中二蒽酮类化合物的检测方法。本发明利用超高效液相色谱-串联四级杆质谱联法对何首乌中的二蒽酮类化合物进行检测，具有灵敏度高的优势。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种何首乌中二蒽酮类化合物的检测方法，包括以下步骤：

将何首乌、内标物和提取剂混合，经超声，得到待测液；所述提取剂为体积浓度为70％的乙醇溶液；

利用超高效液相色谱-串联四级杆质谱联法对所述待测液进行检测，得到何首乌中各二蒽酮类化合物峰面积比值；

基于各二蒽酮类化合物浓度-峰面积比值的标准曲线，获得何首乌中二蒽酮类化合物的含量；

所述二蒽酮类化合物包括PolygonumnolideC4、PolygonumnolideC3、PolygonumnolideC1、PolygonumnolideC2、反式大黄素二蒽酮和顺式大黄素二蒽酮；

所述超高效液相色谱-串联四级杆质谱联法包括色谱条件和质谱条件；

所述色谱条件包括以下参数：

色谱柱：AgilentZORBAX SB-C₁₈柱，2.1mm×50mm，1.8μm；

柱温：30±5℃；

流量：0.25mL/min；

流动相A：乙腈；

流动相B：质量浓度为0.1％的甲酸水溶液；

梯度洗脱程序：