[发明专利]一种利用Bi2

权利要求书

1.一种利用Bi₂Sn₂O₇/Bi₂S₃异质结增敏的光致电化学生物传感器在检测P53基因中的应用，其特征是：肿瘤抑癌基因P53目标引发外切酶辅助的循环放大反应，释放大量产物链；同时利用目标响应的DNA水凝胶包覆硫离子，通过产物链打开DNA水凝胶定量释放硫离子，与基底材料Bi₂Sn₂O₇发生阴离子交换反应形成Bi₂Sn₂O₇/Bi₂S₃异质结；与单纯的Bi₂Sn₂O₇相比，异质结使光电信号增幅倍数达到63倍，从而实现了对目标P53基因的超灵敏检测；此外构建异质结不仅克服了单一半导体光生载流子复合速度快，光能利用率低的缺点，而且光电流极性由阴极转换为阳极，消除了背景信号的干扰，从而进一步增强了该传感器的检测性能；

具体如下

步骤1.制备DNA水凝胶：将2μL 100μM的丙烯酰胺基修饰的DNA链A和DNA链B加入到94μL的储备液中；该储备液包含10mM Tris，1mM EDTA，140mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl₂，1mM的MgCl₂，和质量比3％的丙烯酰胺；用N₂将该溶液除氧15min，然后加入1.5μL新鲜制备的引发剂过硫酸铵和3μL加速剂TEMED反应5min生成聚丙烯酰胺链P-A和P-B；然后加入2μL100μM的连接DNA和终浓度为50mM的硫化钠形成DNA水凝胶；

步骤2.目标循环放大过程：将10μL 1μM PD DNA和10μL SiO₂-CP在37℃下孵育2h得到SiO₂-CP-PD，再将不同浓度的目标和10U外切酶三加入到上述溶液中在37℃下孵育2h得到大量的产物链PD，然后在70℃下孵育30min灭活外切酶三，离心后取上清液于4℃下备用；

步骤3.Bi₂Sn₂O₇/Bi₂S₃异质结电化学生物传感器及其应用：将0.5mg锡酸铋粉末超声分散到1mL含0.5％壳聚糖的二次水中，取10μL锡酸铋溶液滴到ITO电极，电极控制面积为0.16cm²，在室温下干燥作为基底材料；然后将得到的产物链PD加入到10μL DNA水凝胶中孵育1h打开凝胶释放硫离子；随后取10μL上清液滴到基底锡酸铋材料上，在37℃下保持湿润10min完成阴离子交换反应，形成Bi₂Sn₂O₇/Bi₂S₃异质结，构建光电化学生物传感器，实现目标P53基因的分析检测。