[发明专利]定量A2M的产品在制备子痫前期诊断工具中的应用

说明书

本发明公开了一种定量A2M的产品在制备子痫前期诊断工具中的应用。本发明首次发现A2M在PE孕妇的胎盘及血浆中的表达水平均显著上升。本发明提出A2M作为PE的新型生物标志物在制备子痫前期诊断工具中的应用，当检测到A2M水平上升时可提示PE的发生。定量A2M水平的试剂应用于PE的临床诊断，是对现有研究的一种补充。本发明还提出sFlt‑1和PIGF中的至少一种与A2M作为PE的生物标志物组合物在在制备子痫前期诊断工具中的应用。本发明不仅为PE预测或诊断方面的研究提供了新思路，也有助于进一步研发预防或治疗PE的新药物。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及定量A2M的产品在制备子痫前期诊断工具中的应用。

背景技术

子痫前期(Preeclampsia，PE)是发生于妊娠20周以后的妊娠期特发性疾病，影响着全世界2％-8％的妊娠，严重威胁母婴安全，目前已引起国内外广大学者重视。据报道，在全世界范围内PE的患病率约3％-7％，而在中国PE的患病率远高于世界平均患病率约为9％-10％。该病严重影响母儿健康，是孕产妇和产儿死亡率增加的主要原因之一。临床表现为孕妇血压升高、水肿、蛋白尿等，病情持续恶化可能出现子痫、HELLP综合征、胎儿生长受限(FGR)、胎死宫内等情况。PE病因至今尚未完全阐明，目前认为它是一种“胎盘疾病”，与子宫螺旋小动脉重铸不足、炎症免疫过度激活、血管内皮功能障碍、遗传因素等有关。目前PE比较常见的生物标志物包括可溶性血管内皮生长因子受体-1(Soluble fms-liketyrosine kinase 1，sFlt-1)、胎盘生长因子(Placental growth factor，PIGF)等，但它们的特异性、敏感性均有待商榷，尚无法在临床上广泛应用于PE的诊断及预测，寻找PE相关的生物标志物，或者多种蛋白标志物联用是国内外学者的共同挑战。

α2巨球蛋白(α2-macroglobulin，A2M)是血浆中含量丰富的大分子糖蛋白，其相对分子质量为725000，由大小为180000的四个相同亚基组成，每一个亚基上均含有5个功能区，分别是诱饵区、内部硫酯键、受体结合位点、谷氨酰胺转移酶反应位点以及锌离子结合位点。它首先被认为是广谱蛋白酶抑制剂，并且是一种泛蛋白酶抑制剂，可以机械地抑制所有蛋白酶家族。它在循环中清除蛋白酶，调节纤维蛋白溶解，凝血和补体激活中起重要作用。与其他的通过封闭蛋白酶的活性位点来发挥作用的蛋白酶抑制剂不同，A2M通过一种特殊的“捕获”机制结合蛋白酶分子，使其与底物隔离来发挥作用。其分子机制是：当A2M与蛋白酶结合时，其分子中的诱饵区首先受到蛋白酶的作用，使内部硫酯键断裂并引发其分子构象发生变化，形成笼子结构并将蛋白酶包裹在里面，阻碍其与蛋白底物接近。A2M与蛋白酶反应发生变构后，导致其暴露C端的受体结合结构域，该结构域能被一些细胞(如肝细胞、巨噬细胞等)表面的受体CD91/LRP识别并介导内吞，然后通过细胞内溶酶体途径被迅速地解除清除。此外，A2M还能结合许多细胞因子(如TGFβ、IL1β和TNFα等)，生长因子(如VEGF、PDGF、NGF等)和激素等物质，而且它们与不同构象的A2M亲和力并不相同。TGFβ、IL1β和TNFα等与活化的A2M有较强的亲和力，而PDGF、NGF和EGF等与原始构象的A2M优先结合。另外，A2M在炎症组织被氧自由基(ROS)氧化后，其结合细胞因子的特性发生改变，如对TNFα、IL-6和IL1β等促炎细胞因子的结合力显著增强，并抑制其活性，而与TGFβ、bFGF、NGF、PDGF-BB等生长因子的亲和力大大降低。因此，A2M特异性地调节不同细胞因子在体内的分布、半衰期和生物学活性，发挥广泛和多样的生物功能。

近年来有研究表明A2M用于治疗放射性皮肤黏膜溃疡损伤、放射性肺炎、放射性膀胱炎、角膜炎及角膜溃疡具有良好效果。A2M还可作为判断肝纤维化分期、胰腺炎病情轻重的一个生物标记物。但目前尚未发现A2M与PE之间的相关研究。

综上所述，临床亟需遴选更多有价值的生物标志物，以对PE的诊断提供更可行、高效且更经济的参考。

发明内容

针对现有技术中存在的缺点与不足，本发明的目的在于提供定量A2M的产品在制备子痫前期诊断工具中的应用。