[发明专利]D-色氨酸甲酯盐酸盐中L-色氨酸甲酯盐酸盐的检测方法

说明书

本发明涉及一种D‑色氨酸甲酯盐酸盐中L‑色氨酸甲酯盐酸盐的检测方法，所述方法采用高效液相色谱法，所述方法，步骤如下：步骤1，供试品溶液的制备：取D‑色氨酸甲酯盐酸盐样品适量，加正己烷‑乙醇混合溶剂，制成溶液，作为供试品溶液；步骤2，杂质定位溶液的制备：取L‑色氨酸甲酯盐酸盐标准品，加流动相制成溶液，作为手性杂质定位溶液；步骤3，测定法：量取手性杂质定位溶液和供试品溶液，分别注入液相色谱仪；步骤4，供试品溶液在L‑色氨酸甲酯盐酸盐处如有杂质峰，按面积归一化法计算其含量。

技术领域

本发明涉及一种药物检测方法，特别涉及D-色氨酸甲酯盐酸盐 中L-色氨酸甲酯盐酸盐的检测方法。

背景技术

D-色氨酸甲酯盐酸盐是合成他达拉非(如图1所示)的重要原料。

D-色氨酸甲酯盐酸盐，结构式如下：

CAS号为14907-27-8，

分子式为C12H15ClN2O2，

熔点:213-216℃,

储存条件:2-8℃,

水溶解性:溶于水(150mg/ml),DMF(50mg/ml)。

现有D-色氨酸甲酯盐酸盐的制备方法如：将D-色氨酸(50g)加 入到甲苯(650ml)和甲醇(105ml)的混合溶液中搅拌均匀，在0摄氏度 下缓慢滴加氯化亚砜(38.6g)，滴加完毕后升温至75～80℃回流反应4 小时后，反应结束，将反应液冷却至0摄氏度下搅拌2小时，析出固 体，过滤，滤饼用甲苯洗涤，在50℃下真空干燥6h，得到D-色氨酸 甲酯盐酸盐，白色粉末固体。收率95％，HPLC纯度99％。

D-色氨酸甲酯盐酸盐作为光学异构体，在制备过程中，可能残留 同分异构体L-色氨酸甲酯盐酸盐，该异构体的存在对于进一步制备 他达拉非非常不利，因此有必要将D-色氨酸甲酯盐酸盐中的L-色氨 酸甲酯盐酸盐尽可能多的消除，为此，首先需要对D-色氨酸甲酯盐 酸盐中L-色氨酸甲酯盐酸盐的检测方法进行研究，本发明经过研究， 得到一种检测方法。

发明内容：

一种D-色氨酸甲酯盐酸盐中L-色氨酸甲酯盐酸盐的检测方法， 所述方法采用高效液相色谱法，所述方法，步骤如下：

步骤1，供试品溶液的制备：取D-色氨酸甲酯盐酸盐样品适量， 加正己烷-乙醇混合溶剂，制成溶液，作为供试品溶液。

步骤2，杂质定位溶液的制备：取L-色氨酸甲酯盐酸盐标准品， 加流动相制成溶液，作为手性杂质定位溶液。

步骤3，测定法：量取手性杂质定位溶液和供试品溶液，分别 注入液相色谱仪；

步骤4，供试品溶液在L-色氨酸甲酯盐酸盐处如有杂质峰，按 面积归一化法计算其含量。

其中，高效液相色谱色谱条件如下：

仪器：高效液相色谱仪

色谱柱：手性色谱柱Chiralpak IC

流动相：正己烷-C1～C3低级醇-二乙胺，比例为60～75:25～40:0.1

检测波长：280-290nm

流速：0.8-1.2mL/min

柱温：30-40℃

进样量：5-30μL

其中，本发明的流动相中，C1～C3低级醇是指碳原子数为1～3 的一元直链醇或支链醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等。