[发明专利]D-色氨酸甲酯盐酸盐中L-色氨酸甲酯盐酸盐的检测方法

权利要求书

1.一种D-色氨酸甲酯盐酸盐中L-色氨酸甲酯盐酸盐的检测方法，所述方法采用高效液相色谱法，其特征在于，所述方法，步骤如下：

步骤1，供试品溶液的制备：取D-色氨酸甲酯盐酸盐样品适量，加正己烷-乙醇混合溶剂，制成溶液，作为供试品溶液；

步骤2，杂质定位溶液的制备：取L-色氨酸甲酯盐酸盐标准品，加流动相制成溶液，作为手性杂质定位溶液；

步骤3，测定法：量取手性杂质定位溶液和供试品溶液，分别注入液相色谱仪；

步骤4，供试品溶液在L-色氨酸甲酯盐酸盐处如有杂质峰，按面积归一化法计算其含量；

其中，高效液相色谱色谱条件如下：

仪器：高效液相色谱仪

色谱柱：手性色谱柱Chiralpak IC

流动相：正己烷-C1～C3低级醇-二乙胺，比例60～75:25～40:0.1

检测波长：280-290nm

流速：0.8-1.2mL/min

柱温：30-40℃

进样量：5-30μL。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相中，C1-C3低级醇选自乙醇或异丙醇。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，流动相为：

正己烷-乙醇-二乙胺，比例为75：25：0.1。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，流动相为：

正己烷-异丙醇-二乙胺，比例为60：40：0.1。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，色谱条件中，

检测波长：285nm；

流速：1mL/min

柱温：35℃。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，

步骤1，供试品溶液的制备，方法如下：

取D-色氨酸甲酯盐酸盐样品适量，加体积倍为1：1的正己烷-乙醇混合溶剂制成每1ml中含0.4-0.6mg的溶液，作为供试品溶液。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，

步骤2，对照品溶液的制备，方法如下：

取L-色氨酸甲酯盐酸盐标准品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含0.04-0.06mg的溶液，作为手性杂质定位溶液。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，

步骤3，检测，方法如下：

精密量取手性杂质定位溶液和供试品溶液各15-25μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的1.5-2.5倍。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法，步骤如下：

步骤1，供试品溶液的制备

取D-色氨酸甲酯盐酸盐样品适量，加体积倍为1：1的正己烷-乙醇混合溶剂制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；

步骤2，对照品溶液的制备

取L-色氨酸甲酯盐酸盐标准品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含0.05mg的溶液，作为手性杂质定位溶液；

步骤3，检测

精密量取手性杂质定位溶液和供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍；

步骤4，计算

供试品溶液在L-色氨酸甲酯盐酸盐处如有杂质峰，按面积归一化法计算L-色氨酸甲酯盐酸盐含量；

其中，色谱条件如下：

采用手性色谱柱Chiralpak IC，5μm,4.6mm×250mm，以正己烷-乙醇-二乙胺，比例为75:25:0.1为流动相，流速为每分钟1.0ml，柱温为35℃，检测波长为285nm。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法，步骤如下：

步骤1，供试品溶液的制备

取D-色氨酸甲酯盐酸盐样品适量，加体积倍为1：1的正己烷-乙醇混合溶剂制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；

步骤2，对照品溶液的制备

取L-色氨酸甲酯盐酸盐标准品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含0.05mg的溶液，作为手性杂质定位溶液；

步骤3，检测

精密量取手性杂质定位溶液和供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍；

步骤4，计算

供试品溶液在L-色氨酸甲酯盐酸盐处如有杂质峰，按面积归一化法计算L-色氨酸甲酯盐酸盐含量；

其中，色谱条件如下：

采用手性色谱柱Chiralpak IC，5μm,4.6mm×250mm，以正己烷-异丙醇-二乙胺，比例为60：40：0.1为流动相，流速为每分钟1.0ml，柱温为35℃，检测波长为285nm。