[发明专利]柔红霉素的进罐种子的培养方法

权利要求书

1.一种柔红霉素的进罐种子的培养方法，其特征在于，其步骤如下：

S1：菌种活化：将菌种在培养基中于25-29℃下活化培养10-14天，待长出单菌落后，转接至固体斜面培养基上，培养得到菌体，待用；

S2：摇瓶发酵培养：将活化后的菌株制成菌悬液，而后按1-5％体积的接种量将柔红霉素菌悬液接种到摇瓶发酵培养基中，以170-190转/分钟的转速，25-30℃振荡培养40-52小时，即得摇瓶发酵培养液；

S3：种子罐培养：将摇瓶发酵培养液按1％-10％体积接种量接入种子罐中，温度：27-29℃、通风比为：0.05-0.22V/V·m、搅拌速率：160-200rpm、罐压：0.05-0.12Mpa、发酵培养24小时，得种子培养液；柔红霉素发酵种子罐培养过程按照培养时间分为3个阶段：培养0-12h阶段；培养12-16h阶段；培养16-24h阶段；

其中培养0-12h阶段，控制培养温度：27℃；罐压：0.05-0.10MPa；通风比V/V·min：0.05-0.08；搅拌速率：160-180rpm；

培养12-16h阶段，控制培养温度：调节降温系统，通过菌种生长产生的热量将罐温升温至28℃；罐压：0.08-0.10MPa；通风比V/V·min：0.12-0.14，搅拌速率：180-200rpm；

培养16-24h阶段，控制培养温度：29℃；罐压：0.10-0.12MPa；通风比V/V·min：0.20-0.22；搅拌速率：180-200rpm；

S4：发酵罐培养：按3-3.5％体积的接种量将种子培养液接入发酵罐中，通入无菌空气在26-29℃、搅拌速率180-200rpm、罐压0.05-0.12Mpa、发酵培养120-180小时，得到柔红霉素发酵液。

2.根据权利要求1所述的柔红霉素的进罐种子的培养方法，其特征在于：在步骤S3中12-16h阶段流加葡萄糖，控制葡萄糖浓度大于0.3％。

3.根据权利要求1所述的柔红霉素的进罐种子的培养方法，其特征在于：所述步骤S1中的培养基中含有马铃薯、葡萄糖、琼脂。

4.根据权利要求1所述的柔红霉素的进罐种子的培养方法，其特征在于：所述步骤S3中种子罐在128℃下蒸汽空消灭菌30分钟，装入种子培养基后再120℃蒸汽灭菌30分钟，保压降温25-30℃，而后接种摇瓶发酵培养液，种子培养基装量为罐体积的60-70％。