[发明专利]CD20抗体及其治疗癌症的应用

说明书

本发明涉及一种CD20抗体及其治疗癌症的应用，本发明提供一种新的CD20抗体及其制备和用途。其中所述抗体能够更好地结合人CD20蛋白，诱导强烈的CDC杀伤活性，同时能够增强抗肿瘤活性。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体的涉及一种CD20抗体及其治疗癌症的应用。

技术背景

细胞淋巴瘤是发生在细胞的实体肿瘤，主要可以分为霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’slymphoma,HL)和非霍奇金淋巴瘤(Non Hodgkin’s lymphoma,NHL)。在血液系统恶性肿瘤中十分常见，对人类生命健康造成极其严重的威胁。B淋巴细胞抗原CD20是人类B淋巴细胞表面上所特有的标识，主要由297个氨基酸构成。根据不同的磷酸化水平，CD20的分子量为33-37KD，属于非糖基化磷蛋白。CD20分子是一种有四个跨膜区的跨膜蛋白，它的N端和C端都位于细胞质内侧。CD20分子的主要抗原表位位于第三、四跨膜区之间，是一个由43个氨基酸组成的环状区域。从前体B细胞到后来的分化过程，CD20广泛表达于B细胞的表面，但是不表达于晚期分化的浆细胞中。CD20表达于B细胞发展的除了最初和最后以外的所有阶段。在B细胞淋巴瘤、毛细胞白血病、B细胞慢性淋巴细胞白血病和黑色素瘤肿瘤干细胞中均被发现。CD20分子位于细胞膜表面，抗体接近的空间位阻较小，因此CD20分子成为治疗细胞淋巴瘤的理想靶点。

利妥昔单抗(Rituxiamb)是第一个被美国食品药品监督管理局(FDA)批准上市并用于治疗NHL的单抗药物。但因Rituximab分子中含有30％的鼠源序列，患者在长期用药以后，易引起人抗鼠抗体免疫应答(HAMA)而产生严重的不良反应。同时，Rituximab的临床反应率只有50％，完全缓解率仅有10％。因此，严重制约了Rituximab在临床中的长期应用。

发明内容

基于上述发现，本发明提供一种人源化的抗体,其免疫原性低，能够更好地结合人CD20蛋白，同时具有良好的抗肿瘤活性。

本发明提供以下技术方案：

一种分离的单克隆抗体(例如，人源化抗体)含有轻链可变区，该轻链可变区含有CDR1区、CDR2区和CDR3区，其中轻链CDR1区、CDR2区和CDR3区分别包含SEQ ID NO:3、4和5；此外还含有重链可变区，该重链可变区含有CDR1区、CDR2区和CDR3区，重链CDR1区、CDR2区和CDR3区分别包含SEQ ID NO:6、7和8；其中该抗体或其抗原结合部分与CD20结合。

在一些实施方案中，本发明所述的抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中轻链可变区序列为SEQ ID NO:1，重链可变区序列为SEQ ID NO:2；其中该抗体或其抗原结合部分与CD20结合。

在一些实施方案中，本发明所述的抗体包含重链和轻链，该重链包含重链可变区和重链恒定区，轻链包含轻链可变区和轻链恒定区，其中，重链可变区和轻链可变区含有上述的氨基酸序列，轻链恒定区和重链恒定区分别包含SEQ ID NO:9和10的氨基酸序列,其中该抗体或其抗原结合部分与CD20结合。

在一些实施方案中，本发明所述的抗体包含两条重链和两条轻链，或由两条重链和两条轻链构成，其中各重链包含上述的重链恒定区序列、重链可变区序列或CDR序列，且各轻链包含上述的轻链恒定区序列、轻链可变区序列或CDR序列。本发明的抗体可以是全长抗体，例如IgG1、IgG2或IgG4亚型。在一些实施方式中，本发明的抗体可以是单链抗体，或由抗体片段构成，例如Fab或Fab’2片段。

在一些实施方案中，本发明所述CD20抗体轻链恒定区进一步优选为κ链。所述抗体重链恒定区进一步优选为IgG1。

在一些实施方案中,本发明的抗CD20抗体或其片段与人CD20特异结合。

在一些实施方案中,本发明的抗CD20抗体能够诱导强烈的CDC活性。