[发明专利]一种非洲猪瘟病毒的间接ELISA抗体鉴别检测试剂盒在审
| 申请号: | 202110073736.1 | 申请日: | 2021-01-15 |
| 公开(公告)号: | CN112834745A | 公开(公告)日: | 2021-05-25 |
| 发明(设计)人: | 鲁龙;步志高;赵东明;刘近;李芳;郭宇;谢彩华;江涛;任灵芝;杨转;姬杰菲;梁静;石书霞;陈焕姣 | 申请(专利权)人: | 禾旭(郑州)生物技术有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司: | 武汉智韬知识产权代理有限公司 42259 | 代理人: | 吕园园 |
| 地址: | 450016 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 非洲 猪瘟 病毒 间接 elisa 抗体 鉴别 检测 试剂盒 | ||
1.一种非洲猪瘟病毒的间接ELISA抗体鉴别检测试剂盒,包括包被板、样品稀释液、酶结合物、阳性对照、阴性对照、显色液A、显色液B、浓缩洗涤液、固体洗液、终止液、用于加样的加样槽、封板膜和用于血清稀释的血清稀释板,其特征在于:所述包被板上包被两种P54蛋白抗原和CD2v蛋白抗原,P54蛋白抗原和CD2v蛋白抗原分别独立地包被在所述被板上的孔内,每升样品稀释液中含有磷酸氢二钠2.9 g、磷酸二氢钾 0.2 g、氯化钠8 g、氯化钾0.2g、BSA 10 g、PROCLIN-300 500 µL、吐温-20 1mL和0.1‰的果绿色素,所述酶结合物为HRP标记的羊抗猪二抗,所述阳性对照为野毒感染抗体,所述阴性对照来源于未感染非洲猪瘟的样本,所述显色液A为所述显色液A为pH 3.0的乙酸钠溶液,其中包含柠檬酸、过氧化脲、乙酸钠,所述显色液B为pH 3.0的TMB溶液,其中包含TMB、甲醇、乙酸钠。
2.根据权利要求1所述的一种非洲猪瘟病毒的间接ELISA抗体鉴别检测试剂盒,其特征在于:所述包被板为96孔板,在所述96孔板的第1、3、5、7、9、11列包被P54蛋白;在第2、4、6、8、10、12列包被CD2v蛋白;所述P54蛋白和CD2v蛋白的包被浓度均为1 µg/mL。
3.根据权利要求1所述的一种非洲猪瘟病毒的间接ELISA抗体鉴别检测试剂盒,其特征在于:所述显色液A的制备方法为:称量柠檬酸5.76g加入适量纯水中,充分混匀,用盐酸调PH值在3.0左右,加入过氧化脲0.5g、乙酸钠6.21g使其完全溶解,加入Proclin-300 0.5mL,再加入双蒸水定容至1000mL,2~8℃保存。
4.根据权利要求1所述的一种非洲猪瘟病毒的间接ELISA抗体鉴别检测试剂盒,其特征在于:所述显色液B的制备方法为:称取TMB 0.2g加入纯水中,用盐酸调节PH至3.0左右,加入柠檬酸5.76g,带起完全溶解后,加入Proclin-300 0.5mL,用量筒量取双蒸水定容至1000mL,2~8℃保存。
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