[发明专利]抗原递呈细胞膜包裹的纳米颗粒及制备方法与应用

说明书

本发明涉及抗原递呈细胞的细胞膜包裹的纳米颗粒，其包括a.纳米颗粒核；b.外膜，其包裹所述纳米颗粒核；所述外膜来源于抗原递呈细胞的细胞膜，和所述抗原递呈细胞经抗原刺激，具有将抗原递呈到细胞表面和激活淋巴细胞的能力。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种纳米颗粒，具体涉及一种抗原递呈细胞膜包裹的纳米颗粒，具体涉及递呈的是单一靶向抗原或者全肿瘤抗原，以用于激活免疫或治疗用途。

背景技术

越来越多的证据表明，免疫疗法能够通过适当调节免疫系统来用于成功治疗各种癌症，并且利用适当的抗原特异性激活杀伤性T淋巴细胞是促进肿瘤消退的主要途径。为了引起抗原特异性抗肿瘤免疫，由抗原呈递细胞(APC) 刺激细胞毒性T细胞群是至关重要，将抗原和佐剂注射入APC和重新注入工程改造的抗原呈递APC是两种主要刺激肿瘤特异性T细胞反应策略。然而，这些方法不可避免地取决于T细胞与APC之间的联系，这是因为T细胞的交叉激活依赖于APC的表面标记。但是不幸的是，许多内源性因素，包括环境易感性、迁移限制、免疫抑制和代谢限制，都可能影响APC的固有功能。此外，由于时间和空间限制，APC与T细胞之间的接触常常不足，导致抗原呈递和T细胞活化不足。

为了解决这些困难，目前已存在多种模仿内源性对应物功能的人工APC，以表达合适的生物学信号，例如主要的组织相容性复合体(MHC)蛋白和共刺激标记。参与并激活T细胞除了基于细胞的人工APC之外，在表面上结合有必需配体(包括CD28激动剂和抗原决定簇的MHC)的颗粒APC也已成为的类似物，可以促进抗原呈递，尽管人工APC具有适应性细胞的潜力。皮下给药后，基于放射的疗法和合成颗粒穿透淋巴结的优势，人造系统的构建也可以得到改善。此外，可以将嵌入表位的MHC多聚体复合物进行工程改造，因为很少有人研究单个表位。另外，引入某些APC的膜蛋白可以完全赋予与T细胞相互作用的部分功能，其应用可以需要进一步研究。因此，非常需要一种既方便又通用的替代方法，即使具有一系列未鉴定的肿瘤相关抗原表位，也能直接交叉引发T细胞。

发明内容

本申请涉及了一种抗原递呈细胞的细胞膜包裹的纳米颗粒，其包括，

a.纳米颗粒核；

b.外膜，其包裹所述纳米颗粒核；

所述外膜来源于抗原递呈细胞的细胞膜，和所述抗原递呈细胞经抗原刺激，具有将抗原递呈到细胞表面和激活淋巴细胞的能力。

所述纳米颗粒核由具有生物相容性的或合成的材料，其选自聚(乳酸-乙醇酸)共聚物(PLGA)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚己酸内酯(PCL)、聚赖氨酸以及聚谷氨酸；优选的，所述纳米颗粒核包括聚(乳酸-乙醇酸)共聚物(PLGA)。

优选地，所述外膜，来源于成熟的树突状细胞。

优选地，所述的抗原递呈细胞经过包裹有抗原的纳米颗粒活化；所述抗原源自癌细胞；所述抗原递呈细胞为DC细胞。

纳米颗粒的制备方法，包括步骤，

组合纳米颗粒核和外膜，以形成外膜包裹的纳米颗粒，其中所述的外膜来自抗原递呈细胞的细胞膜；

纳米颗粒的制备方法，包括步骤，

1)组合纳米颗粒核和包括抗原的外膜，以得到包含抗原的纳米颗粒，所述外膜源自细胞的细胞膜或生物相容性膜；

2)将包含抗原的纳米颗粒与抗原递呈细胞相互作用，以具有抗原递呈到细胞表面和激活淋巴细胞的能力；

3)组合纳米颗粒核和来源于步骤2)的抗原递呈细胞的细胞膜，以得到抗原递呈细胞的细胞膜包裹的纳米颗粒。

利用纳米颗粒级联激活淋巴细胞的方法，其特征在于，利用纳米颗粒与淋巴细胞相互作用以激活淋巴细胞；

优选地，其包括如下步骤：