[发明专利]一种用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法

权利要求书

1.一种用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法，其特征在于，所述用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法包括：

采用活体荧光成像仪进行肿瘤细胞外泌体分布靶器官不同时间成像信息的动态跟踪；根据活体荧光成像仪获得的动态跟踪信息再通过离体荧光成像仪进行肿瘤细胞外泌体分布靶器官不同时间成像信息的动态跟踪。

2.如权利要求1所述的用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法，其特征在于，所述不同时间包括：4h、24h及48h。

3.如权利要求1所述的用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法，其特征在于，所述采用离体荧光成像仪进行肿瘤细胞外泌体分布靶器官不同时间成像信息的动态跟踪包括：对离体裸鼠的心、肝、肾、脾、胃、小肠器官进行离体荧光成像，获取肿瘤细胞外泌体分布靶器官成像分布信息。

4.如权利要求1所述的用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法，其特征在于，所述采用活体荧光成像仪或离体荧光成像仪进行肿瘤细胞外泌体分布靶器官不同时间成像信息的动态跟踪前还需进行：

步骤一，提取肿瘤细胞外泌体，并利用质膜染色剂对肿瘤细胞来源外泌体进行荧光标记，得到荧光标记的外泌体和荧光染料残留的混合物；

步骤二，向荧光标记的外泌体和荧光染料残留的混合物中加入PBS并进行超速离心，得到荧光标记的肿瘤细胞外泌体；

步骤三，将荧光标记好的肿瘤细胞外泌体和稀释的荧光染料应用于裸鼠。

5.如权利要求4所述的用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法，其特征在于，步骤一中，所述利用质膜染色剂对肿瘤细胞来源外泌体进行荧光标记包括：

将100μg外泌体使用PBS稀释至1mL；按照质膜染色剂与肿瘤细胞来源外泌体体积比例1:200进行混合，并于37℃下孵育20分钟。

6.如权利要求4所述的用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法，其特征在于，步骤一中，所述质膜染色剂为Vybrant DID，所述Vybrant DID激发波长和发射波长分别为600nm和670nm。

7.如权利要求4所述的用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法，其特征在于，步骤二中，所述向荧光标记的外泌体和荧光染料残留的混合物中加入PBS并进行超速离心，得到荧光标记的肿瘤细胞外泌体包括：

(1)向荧光标记的外泌体和荧光染料残留的混合物中加入PBS稀释至35mL；并于120000g下超速离心90min；

(2)去除上清，并用无菌吸水纸吸干，蓝色沉淀使用100μL PBS吹打溶解后保存备用。

8.一种实施权利要求1～2、4～7任意一项所述用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法的在外泌体介导的癌症器官特异性转移机制检测上的应用。

9.一种如权利要求1所述用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法在在癌症靶向性治疗检测上的潜在应用。

10.一种如权利要求1所述用于确定肿瘤细胞来源外泌体体内分布信息的方法在肿瘤来源外泌体的功能分析设备或以肿瘤来源外泌体为基础的标志物开发上的应用。