[发明专利]精准RNA浓度检测方法、装置、设备、介质及应用在审
申请号: | 202110010011.8 | 申请日: | 2021-01-05 |
公开(公告)号: | CN112834440A | 公开(公告)日: | 2021-05-25 |
发明(设计)人: | 公杰;张俊宾;郭求真;谭卿 | 申请(专利权)人: | 广州睿贝医学科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/25 | 分类号: | G01N21/25;G01N21/27;G01N21/31 |
代理公司: | 广州智斧知识产权代理事务所(普通合伙) 44649 | 代理人: | 孔德超 |
地址: | 510000 广东省广州市番禺区钟*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 精准 rna 浓度 检测 方法 装置 设备 介质 应用 | ||
本发明实施例涉及光谱检测技术领域,公开了精准RNA浓度检测方法、装置、设备、介质及应用。该方法包括:接收采集的污染物在波长为260nm、280nm以及320nm下的总光密度;扣除总光密度中的背景参比,得到基础总光密度,分解基础总光密度;根据比例常数△OD280RNA%以及△OD260PRO%对公式进行改写,求取△OD260RNA和△OD280PRO;根据△OD260RNA、△OD280PRO以及△OD260PRO%计算污染物中RNA的浓度M以及蛋白质的浓度N。实施本发明实施例,将同一个污染物中因RNA及蛋白质产生的综合光谱进行拆分,达到同时检测RNA和蛋白质的目的。
技术领域
本发明涉及光谱检测技术领域,具体涉及精准RNA浓度检测方法、装置、设备、介质及应用。
背景技术
在生物学研究,特别是分子生物学研究中,经常会涉及RNA的浓度检测。传统的RNA浓度检测采取紫外光吸收的方法,在260nm波长下测量10mm光程RNA的光吸收(即光密度,记为OD260),并通过OD260计算RNA浓度:
RNA浓度=40*OD260(单位:ng/ul)
但是当存在污染时,比如蛋白质污染,在260nm波长下会产生干扰光吸收,而造成RNA浓度偏高,而产生严重误差。现有技术中,如果需要准确获取RNA的浓度,则需要对蛋白质污染的RNA进行提纯,然后再对提纯后的RNA进行测量,这种实现方式较为复杂,成本高。
发明内容
针对所述缺陷,本发明实施例公开了一种精准RNA浓度检测方法、装置、设备、介质及应用,用于对蛋白质污染的RNA进行浓度检测,可以准确获知污染物中RNA和蛋白质的浓度。
本发明实施例第一方面公开一种精准RNA浓度检测方法,所述方法包括:
接收采集的污染物在波长为260nm、280nm以及320nm下的总光密度,所述污染物为含有蛋白质的RNA;
扣除所述总光密度中的背景参比,得到基础总光密度,分解所述基础总光密度:
△OD260Total=△OD260RNA+△OD260PRO (1)
△OD280Total=△OD280PRO+△OD280RNA (2)
其中,△OD260Total和△OD280Total分别为污染物在波长为260nm及280nm下的基础总光密度,△OD260RNA和△OD260PRO分别为污染物中RNA和蛋白质在波长为260nm下的基础光密度,△OD280RNA和△OD280PRO分别为污染物中RNA和蛋白质在波长为280nm下的基础光密度;
根据比例常数△OD280RNA%以及△OD260PRO%对公式(1)和(2)进行改写,分别形成公式(3)和(4):
△OD260Total=△OD260RNA+△OD260PRO%*△OD280PRO (3)
△OD280Total=△OD280PRO+△OD280RNA%*△OD260RNA (4)
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