[发明专利]新型抗PD-L1抗体

说明书

本申请提供了抗PD‑L1抗体。本申请还提供了编码抗PD‑L1抗体的核酸分子、用于表达抗PD‑L1抗体的表达载体和宿主细胞。本申请还提供了产生抗PD‑L1抗体的方法及其用途。

优先权信息

本申请要求于2019年9月25日提交的PCT/CN2019/107689的权益，该PCT/CN2019/107689通过引用完全结合在本文中。

序列表

本申请包含序列表，并且其全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本申请一般而言涉及抗体。更具体地，本申请涉及与PD-L1特异性结合的单域抗体、其制备方法及其用途。

背景技术

临床前和临床结果中越来越多的证据表明靶向免疫检查点成为治疗癌症患者的最有前途的方法。

程序性死亡蛋白1(PD-1)是与CD28具有同源性的免疫球蛋白超家族的抑制性成员，其在T细胞、活化的B细胞和骨髓细胞上表达(Agata等人，同上；Okazaki等人(2002)Curr.Opin.Immunol.14:391779-82；Bennett等人.(2003)J Immunol 170:711-8)，并且在调节免疫系统中的刺激和抑制信号方面具有关键作用(Okazaki，Taku等人.2007International Immunology 19:813-824)。PD-1通过筛选凋亡细胞中的差异表达而被发现(Ishida等人(1992)EMBO J 11:3887-95)。

PD-1具有两种已知的配体，即PD-L1(也称为B7-H1或CD274)和PD-L2(也称为B7-DC或CD273)，它们是B7家族中表达在细胞表面上的成员(Freeman等人(2000)J Exp Med 192:1027-34；Latchman等人(2001)Nat Immunol 2:261-8；Carter等人(2002)Eur J Immunol32:634-43)。PD-L1和PD-L2都是与PD-1结合但不与其他CD28家族成员结合的B7同系物。

在活化的T细胞上表达的PD-1和在肿瘤细胞上表达的PD-L1的相互作用负调节免疫应答并抑制抗肿瘤免疫。PD-L1在多种人癌症中大量存在(Dong等人(2002)Nat.Med 8:787-9)。PD-L1在肿瘤上的表达与食管癌、胰腺癌和其他类型癌症中存活率降低相关，突出显示该途径可作为肿瘤免疫治疗的有希望的靶标。几个研究小组已经证明，PD-1-PD-L1相互作用使疾病恶化，导致肿瘤浸润淋巴细胞的减少，T细胞受体介导的增殖的减少和癌细胞的免疫逃避(Dong等人.(2003)J.Mol.Med.81:281-7；Blank等人.(2005)CancerImmunol.Immunother.54:307-314；Konishi等人.(2004)Clin.Cancer Res.10:5094-100)。通过抑制PD-1与PD-L1的局部相互作用可以逆转免疫抑制。

单域抗体(sdAb)是由单个单体可变抗体结构域组成的抗体。像整个抗体一样，它能够选择性结合特定的抗原。单域抗体比由两条蛋白重链和两条轻链组成的常见抗体小得多。第一个单域抗体是由骆驼科动物中发现的重链抗体改造而来的(Hamers-Casterman C，Atarhouch T，Muyldermans S，Robinson G，Hamers C，Songa EB，Bendahman N，Hamers R(1993)Naturally occurring antibodies devoid of light chains.Nature363(6428):446–448.)；这些被称为VHH片段。目前，对单域抗体的大多数研究基于重链可变结构域。