[发明专利]经修饰的神经氨酸酶

说明书

本发明提供了修饰型神经氨酸酶、编码所述修饰型神经氨酸酶的基因、所述修饰型神经氨酸酶和组织蛋白酶A的组合、编码所述修饰型神经氨酸酶的基因和编码组织蛋白酶A的基因的组合、包含所述基因的载体，以及包含前述任一项的药物组合物。该药物组合物可用于溶酶体贮积病的疗法。

技术领域

相关申请

本申请要求于2019年7月5日向日本专利局提交的日本申请号2019-126376的优先权权益，所述申请通过引用整体并入本文。

本发明涉及经修饰的神经氨酸酶和编码所述经修饰的神经氨酸酶的基因。本发明还涉及经修饰的神经氨酸酶和组织蛋白酶A的组合、编码经修饰的神经氨酸酶的基因和编码组织蛋白酶A的基因的组合。本发明还涉及含有任何这些基因的载体。本发明还涉及含有前述任一项的药物组合物。

背景技术

神经氨酸酶(N-乙酰基-α-神经氨酸酶，也称为溶酶体唾液酸酶)是一类通过水解除去糖链的末端唾液酸残基的糖苷酶。已知人细胞中存在四种类型的神经氨酸酶。其中，神经氨酸酶1(在下文中，也称为NEU1)已被积极研究作为两种临床上类似的神经退行性溶酶体贮积病(即唾液酸贮积症和半乳糖唾液酸贮积症)的靶酶。此外，专利文献1描述了NEU1的缺乏也与淀粉样变性相关，而非专利文献1描述了NEU1也与癌症转移和浸润相关。

溶酶体贮积病(也称为溶酶体病)是一组基于编码酸性水解酶(溶酶体酶)或包含在溶酶体中的辅因子的基因的突变的先天性代谢错误的疾病，其中溶酶体是在细胞内外分解和代谢生物分子的细胞内小器官(细胞器)。溶酶体贮积病是一种不可治愈的疾病。然而，在1990年之后，酶替代疗法(ERT)已经投入实际应用，并在临床上应用于主要具有外周症状的九类患者(非专利文献2)。酶替代疗法是将从导入了正常人溶酶体酶基因的培养动物或植物细胞株分泌并纯化的重组酶制剂定期(每1-2周)连续静脉内施用给患者的方法。然而，酶替代疗法具有适用疾病有限的问题。因此，需要治疗溶酶体贮积病的另一种方法。

现有技术文献

专利文献

专利文献1: JP 2014-526904 A

非专利文献

非专利文献1: Journal of Japanese Biochemical Society, Vol. 80, No. 1,13-23, 2008

非专利文献2: Journal of Pharmaceutical Society of Japan, Vol.138,No.7 (2018)。

发明内容

发明要解决的问题

本发明人已对使用人神经氨酸酶1的基因疗法进行了研究，并且已发现人神经氨酸酶1的过表达引起胞内结晶，导致细胞破裂。因此，已发现将人神经氨酸酶1应用于基因疗法会损害细胞并涉及风险。本发明的一个目的是提供经修饰的神经氨酸酶，其在细胞中不结晶并且可用于基因疗法。本发明的另一个目的是提供将神经氨酸酶1与溶酶体共定位的方法。

本发明人为解决上述问题已进行了广泛研究，并已发现某些经修饰的神经氨酸酶1即使在细胞中过表达时也不结晶。还发现当组织蛋白酶A (CTSA)过表达时，神经氨酸酶1与溶酶体共定位。基于上述发现完成了本发明。

具体地说，本发明涉及：

(1) 经修饰的神经氨酸酶，其包含与SEQ ID NO: 1中所示氨基酸序列具有80％序列同一性的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列相对于SEQ ID NO: 1中所示氨基酸序列具有以下突变：

(i) W173N或K175S突变；和

(ii) K358N突变；

(2) 经修饰的神经氨酸酶，其具有SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3所示的序列；

(3) 核酸，其编码(1)或(2)的经修饰的神经氨酸酶；

(4) 载体，其包含(3)的核酸；