[发明专利]免疫层析法

说明书

一种免疫层析法，其包括：混合工序，通过混合可含有抗原的试样和用单克隆抗体X修饰的磁性粒子即修饰磁性粒子，获得含有磁性粒子复合体的混合物；捕集工序，使用磁性捕集磁性粒子；离解工序，通过混合所捕集到的磁性粒子和离解液，使修饰磁性粒子离解，获得含抗原的液体；中和工序，获得含中和抗原的液体；展开工序，在形成作为含中和抗原的液体中的抗原和用单克隆抗体Y修饰的金粒子即修饰金粒子的复合体的金粒子复合体的状态下，在具有固定有单克隆抗体Z的反应部位的不溶性载体上展开；捕捉工序，在反应部位捕捉金粒子复合体；及银扩增工序，对金粒子复合体进行银扩增，抗体X与抗体Y彼此不同，抗体X与抗体Z彼此不同。

技术领域

本发明涉及一种免疫层析法。

背景技术

由于免疫层析法的操作简便且能够在短时间内进行测定，因此近来被频繁利用。

例如，在用免疫层析法检测流感病毒等抗原的情况下，进行如下操作。

首先，准备用抗体修饰的标记(标记抗体)，并与含有抗原的试样混合。标记抗体与抗原结合，形成复合体。在该状态下，当在具有涂布有与抗原特异性反应的抗体的检测线的不溶性载体上展开时，复合体在检测线(测试线)上与抗体反应而被捕捉，通过肉眼等确认检测。

作为这种免疫层析法，例如可举出专利文献1中公开的方法。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本专利第5728453号公报

发明内容

发明要解决的技术课题

近来，在期待更高灵敏度的免疫诊断法的情况下，对于免疫层析法也要求比以往的方法(例如，专利文献1中公开的方法)更高灵敏度的方法。

因此，鉴于上述情况，本发明的目的在于提供检测灵敏度高的免疫层析法。

用于解决技术课题的手段

本发明人等对上述课题进行深入研究，结果发现，通过进行使用磁性的规定的预处理，并且改变在各工序中使用的单克隆抗体的种类，能够解决上述课题，从而完成了本发明。

即，本发明人等发现通过以下结构能够解决上述课题。

(1)一种免疫层析法，其包括：

混合工序，通过混合可含有抗原的试样和用与上述抗原具有特异性亲和性的单克隆抗体X修饰的磁性粒子即修饰磁性粒子，获得含有作为上述抗原和上述修饰磁性粒子的复合体的磁性粒子复合体的混合物；

捕集工序，使用磁性捕集含有上述磁性粒子复合体的混合物中的磁性粒子；

离解工序，通过混合在上述捕集工序中捕集到的磁性粒子和作为酸性或碱性液体的离解液，使上述修饰磁性粒子从上述磁性粒子复合体离解，获得含抗原的液体；

中和工序，通过使用中和液中和上述含抗原的液体，获得含中和抗原的液体；

展开工序，在形成作为上述含中和抗原的液体中的抗原和用能够与上述抗原结合的单克隆抗体Y修饰的金粒子即修饰金粒子的复合体的金粒子复合体的状态下，在具有固定有能够与上述抗原结合的单克隆抗体Z的反应部位的不溶性载体上展开；

捕捉工序，在上述不溶性载体的反应部位捕捉上述金粒子复合体；及

银扩增工序，对在上述捕捉工序中捕捉到的金粒子复合体进行银扩增，

上述单克隆抗体X与上述单克隆抗体Y彼此不同，

上述单克隆抗体X与上述单克隆抗体Z彼此不同。

(2)根据上述(1)所述的免疫层析法，其中，上述单克隆抗体X、上述单克隆抗体Y及上述单克隆抗体Z均不同。