[发明专利]枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法

权利要求书

1.一种吉氏芽孢杆菌(B.gibsonii)枯草杆菌蛋白酶变体，其包含选自由以下组成的组的一个、两个、三个、四个或更多个氨基酸取代：S039E、S099R、S126A、D127E和F128G，并且进一步包含选自由以下组成的组的一个或多个另外的取代：N074D、N085R、N116R、G160Q、R179Q、N198A/G/L/Q/R/S/T/V、Q200L、R207Q、M211E/L/N/Q、N212Q/S、N242D、N253P和Q256E，其中所述变体与SEQ ID NO:1或2的氨基酸序列具有至少80％同一性。

2.如权利要求1所述的吉氏芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶变体，其中选自由S039E、S099R、S126A、D127E和F128G组成的组的一个、两个、三个、四个或更多个氨基酸取代包含

i)选自由S039E、S099R、S126A、D127E和F128G组成的组的一个或多个取代；

ii)选自S039E-S099R、S039E-S126A、S039E-D127E、S039E-F128G、S099R-S126A、S099R-D127E、S099R-F128G、S126A-D127E、S126A-F128G和D127E-F128G的取代的组合；

iii)选自S039E-S099R-S126A、S039E-S099R-D127E、S039E-S099R-F128G、S039E-S126A-D127E、S039E-S126A-F128G、S039E-D127E-F128G、S099R-S126A-D127E、S099R-S126A-F128G、S099R-D127E-F128G和S126A-D127E-F128G的取代的组合；

iv)选自S039E-S099R-S126A-D127E、S039E-S099R-S126A-F128G、S039E-S099R-D127E-F128G、S039E-S126A-D127E-F128G和S099R-S126A-D127E-F128G的取代的组合；以及

v)S039E-S099R-S126A-D127E-F128G的组合。

3.如权利要求1或2所述的吉氏芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶变体，其中所述变体包含：

i)进一步与选自由N074D、N198G、M211Q、N212Q和N242D组成的组的一个或多个取代组合的取代S099R；

ii)与选自由N074D、N198G、N212Q和N242D组成的组的一个或多个取代组合的取代S039E-S099R；

iii)与选自由N198G、M211Q、N212Q和N242D组成的组的一个或多个取代组合的取代S099R-F128G；

iv)与选自由M211Q、N212Q和N242D组成的组的一个或多个取代组合的取代S039E-S099R-F128G；或

v)与选自由N074D、N212Q和N242D组成的组的一个或多个取代组合的取代S099R-S126A-F128G；

vi)与选自由N074D、M211Q和N212Q组成的组的一个或多个取代组合的取代S039E-S099R-D127E；或

vii)与选自由N074D、N198A、M211Q、M211E和N242D组成的组的一个或多个取代组合的取代S099R-S126A-D127E-F128G。