[发明专利]基因沉默的中介体

权利要求书

1.一种分离的tRNA衍生的多核苷酸，包含与靶基因的内含子区或长非编码RNA的内含子区互补的序列，其中所述tRNA衍生的多核苷酸是具有14至35个核苷酸的tRNA衍生的多核苷酸片段(tsRNA)。

2.根据权利要求1所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中所述tsRNA是双链的或单链的。

3.根据权利要求2所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中双链tsRNA是平末端的。

4.根据权利要求3所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中所述双链tsRNA包含突出端。

5.根据前述权利要求中任一项所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中所述tRNA衍生的多核苷酸经化学修饰。

6.根据权利要求1所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中所述多核苷酸是tRNA。

7.根据权利要求6所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中所述tRNA包含茎-环/发夹结构。

8.根据前述权利要求中任一项所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中所述多核苷酸结合靶基因的mRNA的内含子区，从而抑制基因表达。

9.根据前述权利要求中任一项所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含与所述靶基因的内含子区至少50、60、70、80、90或95％互补的序列。

10.根据前述权利要求中任一项所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中所述靶基因与病理状况相关。

11.根据权利要求10所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中所述病理状况选自癌症、自身免疫性疾病、神经退行性疾病、代谢疾病、呼吸疾病和心血管疾病。

12.根据前述权利要求中任一项所述的分离的tRNA衍生的多核苷酸，其中所述tRNA和所述tsRNA位于细胞核中。

13.一种载体，包含根据权利要求1至12中任一项所述的分离的tRNA片段。

14.一种宿主细胞，包含根据权利要求1至12中任一项所述的分离的tRNA片段或权利要求13的载体。

15.一种抑制生物系统中靶基因表达或长非编码RNA表达的方法，所述方法包括：

将根据权利要求1至12中任一项所述的tRNA衍生的多核苷酸或根据权利要求13的载体引入所述生物系统中。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述生物系统选自真核细胞，例如哺乳动物细胞或植物细胞。

17.根据权利要求15或16所述的方法，其中所述方法进一步包括将酶引入所述生物系统中，其切割tRNA以产生tsRNA。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述酶是Dicer。

19.根据前述权利要求15至18中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括将所述tRNA衍生的多核苷酸引入细胞的细胞核中。

20.根据权利要求15至19中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括将酶引入所述生物系统中，其将所述tRNA衍生的多核苷酸转运至细胞核。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述酶包含Argonaute2(Ago2)。