[发明专利]肽沉淀方法

权利要求书

1.一种获得完全脱保护的肽的方法，所述方法包括以下步骤

a.)合成具有至少一个酸不稳定保护基的肽中间体

b.)使用包含酸和任选的清除剂和/或非质子溶剂的裂解试剂去除所述保护基以形成裂解的肽溶液(I)，然后

c.)向所述裂解的肽溶液(I)提供有机溶剂以形成裂解的肽溶液(II)，所述有机溶剂选自氯仿、二氯甲烷或式(I)的酯溶剂，

其中R¹和R²彼此独立地为直链或支链的C₁-C₁₀烷基或C₃-C₆环烷基，然后

d.)提供一定量的沉淀剂以从所述裂解的肽溶液(II)中沉淀所述肽，所述沉淀剂选自至少一种醚溶剂和至少一种烃溶剂及其混合物；以及

e.)收集所述沉淀物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤b.)中的酸选自甲酸、乙酸、三氟乙酸、磺酸、溴化氢、三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯、三甲基溴化甲硅烷及其混合物，优选选自乙酸、三氟乙酸和甲磺酸及其混合物。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，相对于所述肽中间体中存在的酸不稳定保护基的数量，所述酸的量在0.1至1000摩尔当量，更优选10至500摩尔当量，甚至更优选20至400摩尔当量的范围内选择。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述清除剂选自苯酚、三烷基硅烷、硫醇和水及其混合物，优选选自三异丙基硅烷、十二烷硫醇和水及其混合物。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，相对于所述肽中间体中存在的酸不稳定保护基的数量，所述清除剂的量在0.1至500摩尔当量，更优选1至100摩尔当量，甚至更优选2至50摩尔当量的范围内选择。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述裂解试剂中的非质子溶剂选自液体芳族烃或C_1-6卤代烷烃及其混合物。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述非质子溶剂的量在0.25至10ml/g肽中间体的范围内，更优选在0.5至5ml/g肽中间体的范围内，最优选在0.75至1.5ml/g肽中间体的范围内选择。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述裂解试剂的量在0.5至50ml/g肽中间体的范围内，更优选在1至50ml/g肽中间体的范围内，最优选在2.5至20ml/g肽中间体的范围内选择。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于步骤c.)中的所述有机溶剂的量在0.5至100ml/g肽中间体的范围内，更优选地在1至50ml/g肽中间体的范围内，最优选在5至35ml/g肽中间体的范围内选择。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，式(I)的酯溶剂选自乙酸乙酯、丙酸乙酯、乙酸丙酯和乙酸二异丙酯及其混合物。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，步骤d.)中的醚溶剂选自环戊基甲基醚、二丁基醚、二乙基醚、二异丙基醚、乙基叔丁基醚、甲基叔丁基醚及其混合物，优选选自二乙基醚和甲基叔丁基醚及其混合物。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述肽掺入一个或多个氨基酸的2至20个、优选2至15个、更优选3至12个、最优选3至6个残基。

13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述肽在末端α-氨基被亲脂性部分取代，所述亲脂性部分选自乙酰基、苯甲酰基或十四烷基氨基羰基部分。