[发明专利]一种保持人牙髓干细胞干性的细胞微图案方法

权利要求书

1.一种保持人牙髓干细胞干性的细胞微图案方法，包括两种模式：(1)长宽比为1：2的矩形微图案模式(2)长宽比为1：4的矩形微图案模式，其特征是：

(1)每种微图案模式的矩形微图案不少于5000个；

(2)细胞微图案形状按照轴对称和中心对称的模式均匀排列，确保人牙髓干细胞顺利按照微图案的形状生长，每个微图案上有一个人牙髓干细胞贴壁生长；

(3)长宽比为1：2的矩形微图案模式中微图案的形状为矩形，长45微米，宽22.5微米；

(4)长宽比为1：4的矩形微图案模式(2)中微图案的形状为矩形，长64微米，宽14微米。

2.根据权利要求1所述的细胞微图案方法，其特征是，长宽比为1：2的矩形微图案模式(1)5000个矩形以上的微图案形成行间距90微米，列间距45微米的微图案阵列。

3.根据权利要求1所述的细胞微图案方法，其特征是，长宽比为1：4的矩形微图案模式(2)5000个以上的矩形微图案形成行间距128微米，列间距28微米的微图案阵列。

4.根据权利要求1-3所述的细胞微图案方法，其特征是，该方法按照细胞微图案的标准制作，使用聚二甲基硅氧烷PDMS制作细胞微图案印章，在厚度0.17毫米，玻璃片上制备细胞微图案。

5.一种保持人牙髓干细胞干性的细胞微图案方法，其特征在于以下各个步骤：

(1)将纤维粘连蛋白FN按照50微克每毫升的浓度溶解于去离子水中；

(2)将FN溶液在带有微图案聚二甲基硅氧烷PDMS印章上孵育，置于37℃恒温细胞培养箱中1小时；

(3)孵育完成后将微图案印章置于覆盖PDMS的厚度0.17毫米的盖玻片上，将纤维黏连蛋白从微图案印章上转移至盖玻片上；

(4)配制以α-MEM培养基为基础，包含体积百分含量为10％的胎牛血清、100U/ml的青霉素钠和100mg/ml的链霉素；

(5)将人牙髓干细胞按照15000～25000个每平方厘米的密度接种在上述微图案的盖玻片上，添加适量的培养基得到排列成特殊形状的细胞微图案培养体系。