[发明专利]一种索马鲁肽的纯化方法在审

专利信息
申请号: 202011629639.8 申请日: 2020-12-30
公开(公告)号: CN112940102A 公开(公告)日: 2021-06-11
发明(设计)人: 谢宇;沈杰;王良友;张璐;黄金城;宋亮 申请(专利权)人: 苏州天马医药集团天吉生物制药有限公司
主分类号: C07K14/605 分类号: C07K14/605;C07K1/16;C07K1/06
代理公司: 苏州睿昊知识产权代理事务所(普通合伙) 32277 代理人: 陈华红子
地址: 215101 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 索马鲁肽 纯化 方法
【权利要求书】:

1.一种索马鲁肽的纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:

S1、溶解:将索马鲁肽粗肽溶解在乙腈水溶液中得到索马鲁肽水溶液,加热去除保护基团;

S2、一次纯化:将S1步骤的索马鲁肽水溶液以聚合物填料为固定相的色谱柱,以碳酸氢铵为A相,乙腈为B相,进行梯度洗脱,收集主峰样品;

S3、二次纯化:将S2步骤收集的样品以八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱,以磷酸二氢铵溶液为A相,乙腈为B相,进行梯度洗脱,收集主峰样品;

S4、转盐:将S3步骤收集的样品以八烷基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱,一阶段用醋酸铵水溶液为A相,乙腈为B相进行等度洗脱;二阶段用40~50mg/L氢氧化钠水溶液为A相,加入15~25%A相的乙腈为B相进行梯度洗脱,收集主峰样品,浓缩冻干后得到索马鲁肽成品。

2.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,S1步骤中,索马鲁肽水溶液中索马鲁肽的浓度为4~6mmol/L。

3.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,S1步骤中,加热是在40~45℃加热1.5~2小时。

4.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,S2步骤中,所述的聚合物填料的规格为10μm、

5.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,S2步骤中,所述的碳酸氢铵采用磷酸调节pH至7.0~7.5。

6.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,S2步骤中,B相的洗脱梯度为25%-40%,洗脱时间为40~60min。

7.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,S3步骤中,所述的磷酸二氢铵溶液的浓度为45~55mmol/L,并采用磷酸调节pH至3.0~4.0。

8.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,S3步骤中,B相的洗脱梯度为35%-45%,洗脱时间为40~60min。

9.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,S4步骤中,醋酸铵水溶液的浓度为40~60mmol/L,一阶段,醋酸铵水溶液与乙腈体积比95:5进行等度洗脱10~20min。

10.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,S4步骤中,二阶段B相的洗脱梯度为30%-50%,洗脱时间为40~60min。

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