[发明专利]一种适用于葛仙米营养生长的改良培养基及配制方法

说明书

本发明公开了一种适用于葛仙米营养生长的改良培养基及配制方法：分别配制A液母液、B液母液、C液母液、D液母液、E液母液，F液母液；A液为硝酸钠25.0g/L，磷酸氢二钾0.800g/L和七水合硫酸镁1.50g/L；B液为柠檬酸3.00g/L，柠檬酸铁铵3.00g/L和乙二胺四乙酸二钠0.500g/L；C液为无水氯化钙13.6g/L；D液为碳酸钠20.0g/L；E液为硼酸2.86g/L，四水合氯化锰1.81g/L，七水合硫酸锌0.220g/L，钼酸钠0.390g，五水合硫酸铜0.0800g/L和六水合氯化钴0.0400g/L；F液为土壤浸出液，以1000g土壤加洁净自来水1000mL搅拌，用滤纸滤过而得。溶剂为蒸馏水，使用时依次将定量A液、B液、C液、D液、E液和F液母液溶于溶剂中，用氢氧化钠或盐酸调节pH值到7.1，在121℃，0.1Mpa，灭菌20min。本发明的改良培养基可储存。

技术领域

本发明涉及一种适用于微藻养殖的培养基及配制方法，具体涉及一种适用于葛仙米生长的改良培养基及配制方法，尤其涉及一种适用于葛仙米营养生长的改良培养基及配制方法，该培养基适用于普通葛仙米和翡翠绿葛仙米的规模化培养。

背景技术

葛仙米（Nostoc sphaeroides Kützing），俗称田木耳、天仙米，是一种多细胞群体淡水蓝藻，在分类学上属于蓝藻门（Cyanophyta），蓝藻纲（Cyanophyceae），藻殖段目（Hormogonales），念珠藻科（Nostocaceae），念珠藻属（Nostoc）。葛仙米是我国传统出口的一种珍贵野生食药两用蓝藻，具有丰富的营养价值。根据现代营养检测分析，葛仙米富含蛋白质、维生素、微量元素和藻胆蛋白，葛仙米的藻胆蛋白具有抗氧化和提高免疫力的功效。其中，葛仙米还可以分泌多种具生物活性的胞外多糖，多糖具有抗肿瘤、免疫、降血糖、抗病毒等生物活性。随着对葛仙米多糖的深入研究，有望生产出新的制剂或药物，其在临床应用方面具有良好的前景。野生葛仙米常见于河流石块和水稻田中，在我国大部分地区有分布，其中湖北鹤峰的走马镇产量最多，最高年产量曾达25×10³kg干藻体，现在由于农药化肥的使用，使其产量锐减至0.5×10³kg。因此，葛仙米的人工培植技术势在必行，葛仙米营养培养基及其高效的配制方法日趋重要。

葛仙米的发育存在不可动的原植体期和可动的藻殖段期两个明显而重要的个体发育阶段。对于葛仙米的藻殖段发育过程，一般都会经历失去伪空泡，形成胶鞘，分化出异形胞，经双线期，非丝状体到丝状体期，最后形成原植体，原植体在有硝态氮的情况下形成较快。在有硝态氮存在的情况下，葛仙米的异形胞数量会减少，但是并不阻止异形胞的分化。目前工厂化大规模培养葛仙米最大的壁垒就在于原植体期的葛仙米群体容易发生破裂，严重降低产量。

葛仙米培养一般采取传统BG11培养基，传统BG11培养基配方为硝酸钠1.50g/L，磷酸氢二钾0.0400g/L，七水硫酸镁0.0750g/L，二水氯化钙0.0360g/L，柠檬酸0.00600g/L，柠檬酸铁铵0.00600g/L，乙二胺四乙酸二钠0.00100g/L，碳酸钠0.0200g/L，微量元素溶液1.0mL内含高硼酸2.86g/L，氯化锰1.81g/L，硫酸锌0.222g/L，钼酸钠0.390g/L，五水硫酸铜0.0790g/L和硝酸钴45.4g/L。该培养基已在实验室和工厂化养殖中沿用多年，且有在葛仙米培养方面取得不错的效果。但是，传统BG11培养基仍有不足之处。1.传统培养基由于配方之间没有分批投放，易导致如七水合硫酸镁中的硫酸根离子和二水合氯化钙中的钙离子结合生成沉淀使培养基中营养缺失。2.传统培养基由于失效快，只能现用现配，无法储存，使用繁琐。3.传统培养基所使用的配方原料价格偏高，不符合大规模工厂化生产节约成本的需要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术中存在的不足，而提供一种适用于葛仙米营养生长的改良培养基及配制方法，对传统BG11培养基进行改良，可以有效解决传统培养基易生成沉淀导致营养缺失，无法存储，使用繁琐，原料价格高等技术缺陷。