[发明专利]一种GAS样基序突变的PCV2毒株及其制备方法和应用有效
申请号: | 202011626875.4 | 申请日: | 2020-12-30 |
公开(公告)号: | CN112725291B | 公开(公告)日: | 2023-07-04 |
发明(设计)人: | 黄勇;童德文;韩聪;杜谦;朱磊 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/34;C12N5/071;C12R1/93 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 范巍 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 gas 样基序 突变 pcv2 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种突变的PCV2病毒,其特征在于:该突变的PCV2病毒的突变位点位于PCV2病毒DNA与STAT5蛋白结合的序列区域内;
所述与STAT5蛋白结合的序列区域为GAS样基序;
所述突变的PCV2病毒的DNA序列如SEQ.ID.NO.1所示。
2.根据权利要求1所述一种突变的PCV2病毒,其特征在于:所述突变的PCV2病毒不能与宿主细胞内的STAT5蛋白结合,并导致PCV2病毒的复制能力减弱。
3.一种突变的PCV2病毒的感染性克隆载体,其特征在于:该载体包括与克隆载体骨架连接的突变的PCV2病毒的DNA序列,所述突变的PCV2病毒的突变位点位于PCV2病毒DNA与STAT5蛋白结合的序列区域内,所述与STAT5蛋白结合的序列区域为GAS样基序,所述突变的PCV2病毒的DNA序列如SEQ.ID.NO.1所示。
4.一种突变的PCV2病毒的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)扩增或人工合成突变的PCV2病毒的DNA序列,所述突变的PCV2病毒的突变位点位于PCV2病毒DNA与STAT5蛋白结合的序列区域内;
2)将步骤1)得到的DNA序列环化后转染宿主细胞,然后进行培养和传代,得到突变的PCV2病毒,所述与STAT5蛋白结合的序列区域为GAS样基序,所述突变的PCV2病毒的DNA序列如SEQ.ID.NO.1所示。
5.根据权利要求4所述一种突变的PCV2病毒的制备方法,其特征在于:所述步骤1)具体包括以下步骤:以野生型PCV2病毒DNA为模板,通过重叠PCR扩增得到GAS样基序突变的PCV2病毒DNA。
6.一种如权利要求1-2中任意一项所述的突变的PCV2病毒在制备PCV2病毒感染动物模型中的应用。
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