[发明专利]一种液相色谱测定法匹拉韦的方法

说明书

本发明公开了一种液相色谱测定法匹拉韦的方法，包括：S1：标准溶液配制；S2：样品溶液配制：称取法匹拉韦制剂、原料药、中间体或中控反应液，加稀释液配制成法匹拉韦浓度为0.1mg/mL的溶液作为样品溶液；S3：进样分析：取空白溶液、标准品溶液、样品溶液各20μL注入液相色谱仪进行测定，其中柱温35℃，流速1.0mL/min；S4：纪录峰面积，按外标法计算法匹拉韦的含量。本发明操作步骤简便，重现性好，灵敏度高，检测结果准确，可以有效地对研发生产部门做质量指导，也可以让质量部门对中控及成品检测放行有据可依。

技术领域

本发明属于法匹拉韦检测技术领域，具体涉及一种液相色谱测定法匹拉韦的方法。

背景技术

法匹拉韦，是由日本富士胶卷富山化学研制，该药物于2014年3月在日本批准上市，用于甲型、乙型流感的抗病毒治疗。研究表明除流感病毒外，该药还对多种RNA病毒展现出良好的抗病毒作用，如埃博拉病毒、沙粒病毒、布尼亚病毒、狂犬病毒等。新型冠状病毒属于冠状病毒，是具有外套膜的正链单股RNA病毒，从机制上讲，法匹拉韦对新型冠状病毒也具有潜在的抗病毒作用。2020年3月17日，科技部生物中心主任张新民介绍，法匹拉韦已完成临床研究，显示出良好的治疗2019-nCoV临床疗效。基于化学合成过程中不可避免的使用各种原材料，会产生除目标产物外的其它副产物，而终产品在储存、制剂过程中也会降解，本发明法匹拉韦原料药及中间体的液相色谱测定方法可以很好地控制产品的质量，包括含量、含中间体在内的固有杂质、降解产物等。

发明内容

本发明的目的在于提供一种液相色谱测定法匹拉韦的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种液相色谱测定法匹拉韦的方法，按照先后顺序包括以下步骤：

S1：标准溶液配制：法匹拉韦成品或中间体标准品适量，加稀释液配制成法匹拉韦浓度为0.1mg/mL的溶液作为标准品溶液；

S2：样品溶液配制：称取法匹拉韦制剂、原料药、中间体或中控反应液，加稀释液配制成法匹拉韦浓度为0.1mg/mL的溶液作为样品溶液；

S3：进样分析：以初始条件平衡仪器，等基线平衡后，取空白溶液、标准品溶液、样品溶液各20μL注入液相色谱仪进行测定，其中柱温35℃，流速1.0mL/min；

S4：纪录峰面积，按外标法计算法匹拉韦的含量，

法匹拉韦样品中法匹拉韦含量按照以下公式计算：

所述设置液相色谱检测条件为采用梯度洗脱条件，如下表：