[发明专利]一种双价人乳头瘤病毒疫苗

说明书

本发明涉及一种复合佐剂双价人乳头瘤病毒疫苗，双价抗原分别为人乳头瘤病毒16型L1蛋白，人乳头瘤病毒18型L1蛋白，复合佐剂成份为BCG‑CpG‑DNA与铝佐剂。与单纯采用铝佐剂的疫苗相比，本发明的疫苗能产生良好的细胞免疫和体液免疫，且大幅降低铝佐剂的用量，安全性更高。

技术领域

本发明涉及疫苗领域，尤其是涉及一种双价人乳头瘤病毒疫苗，及其制备方法。

背景技术

宫颈癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，在全世界女性癌症死亡率中，仅次于乳腺癌，并且呈现出发病年龄年轻化的趋势。人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)的持续性感染是导致宫颈癌及许多生殖器瘤样病变的主要原因。人乳头瘤病毒是一类双链DNA病毒，能感染人的表皮及黏膜上皮，诱导上皮组织的疣状增生乃至良恶性肿瘤。目前已分离鉴定出170多种不同的HPV型别，根据HPV的致病力或致癌危险性的大小，将HPV分为高危型和低危型。高危型包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58等15个型别，主要引起宫颈癌等的恶性病变，流行病学研究显示，90％以上宫颈癌病例中可以检出上述高危型别DNA，其中以16和18型最常见，检出率高达70％以上，16型主要导致鳞状细胞癌，18型则导致腺癌；低危型主要型别有6、11、34、40、42、43和44型等，其中90％以上的生殖器疣与HPV6和HPV11感染相关。根据2012年WHO统计数据显示，全球由HPV感染导致的癌症病例达到527,624例，病死率为50.3％；据统计约86％的病例发生在发展中国家，我国每年宫颈癌新发病例约6万人，死亡约2万人。

接种疫苗是预防HPV感染并进一步预防宫颈癌的最经济有效的手段。天然的HPV呈现T＝7的正二十面体对称结构，其结构简单，衣壳蛋白由主要衣壳蛋白L1和次要衣壳蛋白L2组成，L1蛋白占病毒衣壳蛋白总量的80％～90％。L1蛋白可在体外多种表达系统中表达，例如，酵母菌、昆虫细胞、哺乳动物细胞或细菌等，并能自组装成与天然HPV病毒高度相似的病毒样颗粒(virus like particle，VLP，综述参见Schiller和Roden，PapillomavirusReviews：Current Research on Papillomaviruses；Lacey，ed.Leeds，UK：Leeds MedicalInformation，pp 101-12(1996))。动物实验和人类实验表明VLPs具有较高的免疫原性，能够诱导机体产生高滴度的中和抗体(Breitburd等，J Virol.69(6)：3959-63(1995)；Suzich等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 92(25)：11553-57(1995)；Koutsky等，N.Engl.J.Med.347：1645-51(2002)；Schiller和Hidesheim，J Clin.Virol.19：67-74(2000))。HPV L1蛋白在病毒感染细胞初期具有重要作用，参与细胞表面受体的相互作用。L2约占衣壳蛋白总量的10％～20％，研究发现L2蛋白中存在许多广谱中和表位，具有发展为HPV广谱疫苗的潜力；L2蛋白在病毒感染过程中发挥重要作用，其参与病毒感染的整个过程，包括吸附、内吞入胞、囊泡运输、入核和病毒复制。目前已上市的疫苗均是基于L1VLP研制的，包括默克公司的Gardasil和葛兰素史克公司的Cervarix。默克公司的Gardasil为铝佐剂疫苗，有四价(16、18、6、11)HPV疫苗与九价(6、11、16、18、31、33、45、52、58)HPV疫苗，葛兰素史克公司的Cervarix为二价(16、18)HPV疫苗，使用AS04佐剂系统，含氢氧化铝与单磷酰酯A。而临床研究结果显示接种Cervarix产生的针对HPV16、HPV18的抗体要高于四价Gardasil，尽管目前对这种免疫效果的临床意义尚不明确，至少提示复合佐剂诱导的免疫反应优于单纯的铝佐剂。鉴于国内HPV疫苗研发仅使用铝佐剂，有必要进行国产复合佐剂HPV疫苗的研究。

发明内容

本发明提供一种双价人乳头瘤病毒疫苗组合物，其包含人乳头瘤病毒16型L1蛋白的VLP、人乳头瘤病毒18型L1蛋白的VLP、BCG-CpG-DNA和铝佐剂。