[发明专利]一种研究HSD17B13 rs72613567基因变异和肾功能损伤之间关系的方法

说明书

本发明公开了一种研究HSD17B13 rs72613567基因变异和肾功能损伤之间关系的方法，属于医学技术领域。本发明选择经活检证实为NAFLD的患者作为实验人群，检测患者的HSD17B13基因型，测量患者的肾小球滤过率(eGFR)、尿/血清NGAL和尿白蛋白与肌酐的比值(u‑ACR)，最后利用多变量回归分析的方法确定HSD17B13 rs72613567基因型与基因变异和肾功能损伤之间的关系。结果表明，HSD17B13 rs72613567 A/‑或A/A基因型与较低的蛋白尿风险显著相关，但与u‑NGAL浓度或eGFR水平无关，为早期肾损伤提供新颖的见解。

技术领域

本发明涉及一种研究HSD17B13 rs72613567基因变异和肾功能损伤之间关系的方法，属于医学技术领域。

背景技术

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是由肝脏脂肪变性、非酒精性脂肪性肝炎、晚期纤维化和肝硬化相关的一系列肝脏性疾病组成的综合征。NAFLD与慢性肾脏病(CKD)发病的共同危险因素包括：胰岛素抵抗、血脂异常、慢性炎症和氧化应激增强。无论是通过影像学还是通过肝脏活检证实的NAFLD都会增加微量白蛋白尿、大量蛋白尿以及CKD的患病率。越来越多的证据表明，一些易感的遗传基因变异会导致NAFLD/NASH更容易发生肾脏病，这些遗传变异已经在不同的人群中被认识，例如patatin样磷脂酶域含蛋白-3(PNPLA3)和trans-膜6超家族成员2基因(TM6SF2)。我们前期研究发现，携带PNPLA3 rs738409G等位基因的NAFLD患者早期发生肾小球和肾小管损伤的风险较高。

最近，17-羟甾体脱氢酶13(HSD17B13)被鉴定为肝脏特异性脂滴相关蛋白，在NAFLD研究领域日益受到关注。HSD17B13被Liu等人2007年从第一只克隆人类肝cDNA图文中发现，并发现位于肝脏脂滴表面的差异会导致脂质积累和脂滴扩张，从而在NAFLD发病机制中发挥重要作用。此外，功能缺失的HSD17B13rs72613567变异可能是降低NAFLD进展的治疗靶点。最近，Sessa等研究者发现，在肥胖儿童中，携带HSD17B13 A等位基因的人群eGFR水平高于纯合子人群。然而，rs72613567变异的功能是否影响成人肾功能/损伤尚不清楚。蛋白尿是肾脏损害的尿液生物标志物，常被认为是反映肾脏疾病发生发展的早期标志。众所周知，脂质也可以积聚在肾脏导致蛋白尿和肾功能损伤，就是我们常说的脂质肾损伤；本研究旨在探讨HSD17B13 rs72613567基因变异和肾功能损伤在中国经肝活检证实的NAFLD患者人群中的意义。

发明内容

为了实现上述目的，本发明提供了一种研究HSD17B13 rs72613567基因变异和肾功能损伤之间关系的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)选择经活检证实为NAFLD的患者作为实验人群；

(2)检测患者的HSD17B13基因型；

(3)测量患者的肾小球滤过率(eGFR)、尿/血清NGAL和尿白蛋白与肌酐的比值(u-ACR)；

(4)利用多变量回归分析的方法确定HSD17B13rs72613567基因型与基因变异和肾功能损伤之间的关系。

在本发明的一种实施方式中，步骤(1)中活检证实为NAFLD的患者的过程中，NAFLD的组织学特征根据NASH CRN分型和Brunt标准来定义。

在本发明的一种实施方式中，步骤(2)中，检测基因型时，DNA采用QIAGEN试剂盒进行提取，同时保存于-20℃用于分析，HSD17B13 rs72613567基因分析使用TaqMan检测平台检测，其中，正向引物序列为CAGATTATGGCCTGTATTGGAGAC；反向引物序列为GCTCTATTGGTGTTAGTATTTGGGT；探针报告基因1序列为CTACAGAAGTAAGTACAGCAC；探针报告基因2序列为ACTACAGAAGTTAAGTACAGCA。