[发明专利]一种免疫细胞培养基

说明书

本发明提出一种免疫细胞培养基，包括如下组份：氨基酸混合物、氨基酸盐混合物、酰胺混合物、无机盐混合物、D‑泛酸钙、氯化胆碱、盐酸吡哆醛、盐酸硫胺素、肌醇、生物素、维生素、叶酸、核黄素、丙酮酸钠、葡萄糖、酚红、4‑羟乙基哌嗪乙磺酸、人血白蛋白、转铁蛋白、维生素C磷酸镁、肝素钠、盐酸腐胺、胰岛素、超氧化物歧化酶、胆固醇、油酸、生育酚、棕榈酸、维生素A醋酸酯、碳酸氢钠和甲萘醌。本发明不用补充自体血浆即可适合免疫细胞快速增殖，显著缩短了免疫细胞的培养周期，二维、三维的细胞培养体系均适用，应用范围更广。

技术领域

本发明属于细胞生物学技术领域，特别是指一种免疫细胞培养基。

背景技术

无血清培养基是指不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基，可以应用于培养免疫细胞，例如淋巴细胞、树突状细胞、单核/巨噬细胞等。与有血清培养基相比，无血清培养基不含对细胞有害的动物成分，而且价格相对低。然而，现有的无血清培养基培养免疫细胞时，为了加速细胞繁殖，缩短培养时间，在细胞培养前期需要补充自体血浆，否则很难达到临床的回输标准，而且所耗费的培养时间也更长，在三维培养体系中，该缺陷尤为显著，即使补充自体血浆，免疫细胞的增殖速度也比较慢，所需的培养时间远大于有血清培养基。因此，研发一种不用补充自体血浆即可适合免疫细胞快速增殖、有效缩短培养周期的免疫细胞培养基，是目前急需解决的技术问题。

发明内容

为解决以上现有技术的不足，本发明提出了一种适合免疫细胞快速增殖、有效缩短培养周期的免疫细胞培养基。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种免疫细胞培养基，包括如下组份：氨基酸混合物、氨基酸盐混合物、酰胺混合物、无机盐混合物、D-泛酸钙、氯化胆碱、盐酸吡哆醛、盐酸硫胺素、肌醇、生物素、维生素、叶酸、核黄素、丙酮酸钠、葡萄糖、酚红、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、人血白蛋白、转铁蛋白、维生素C磷酸镁、肝素钠、盐酸腐胺、胰岛素、超氧化物歧化酶、胆固醇、油酸、生育酚、棕榈酸、维生素A醋酸酯、碳酸氢钠和甲萘醌。

经过大量实验研究发现：上述组份以特定的浓度进行配比，各个组份互相协调、共同作用，提供免疫细胞增殖所需要的充足的营养和良好的环境，可以显著提高免疫细胞的增殖速度，极大缩短免疫细胞的培养时间；而且，令人意外的是，本发明在促进免疫细胞高速繁殖的同时，还显著提高了免疫细胞的存活率，而且临床安全性好。

优选的，氨基酸混合物由甘氨酸、L-丙氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、盐酸组氨酸、异亮氨酸、L-亮氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、苏氨酸、L-色氨酸和L-缬氨酸组成；氨基酸盐混合物由L-精氨酸盐酸盐、L-胱氨酸二盐酸盐、赖氨酸盐酸盐和L-酪氨酸二钠组成；酰胺混合物由L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺和烟酰胺组成；无机盐混合物由磷酸二氢钠、氯化钙、氯化钠、硫酸镁、氯化钾、亚硒酸钠、五水硫酸铜和九水合硝酸铁组成。