[发明专利]一种结合Strep-Tag II标签的抗体及其应用

说明书

本发明公开了本发明涉及一种特异性结合Strep标签II的抗体，进一步公开了本发明抗体的氨基酸序列、克隆或表达载体、宿主细胞、以及用于表达或分离抗体的方法，还公开了包含本发明抗体的组合物。本发明还公开了使用本发明抗体检测嵌合抗原受体细胞或工程化细胞受体细胞的方法。

技术领域

本发明涉及一种结合Strep-Tag II标签的抗体，并公开了该抗体的氨基酸序列、克隆或表达载体、宿主细胞、生产抗体的方法以及使用该抗体检测融合多肽的方法。

背景技术

随着肿瘤免疫治疗的发展，CAR-T（Chimeric antigen receptor-T cell，嵌合抗原受体T细胞）和TCR-T（T cell receptor-T cell，工程化T细胞受体T细胞）等细胞免疫治疗策略受到极大关注。CAR-T或TCR-T在体内的扩增水平是指征其疗效的一个重要指标，因此，研发快速准确检测细胞的试剂或方法，将有助于有效监测其在体内外的扩增效率。

目前对于CAR-T或TCR-T细胞进行检测的方法有两种：使用定量实时聚合酶联反应（Quantitative real time PCR，qPCR）检测T细胞中的CAR或TCR的基因表达；以及检测T细胞中的CAR蛋白或TCR蛋白表达。其中，对于检测T细胞中的CAR蛋白表达，常用特异性结合CAR蛋白中scFv（Single-chain variable fragment）片段的抗体对T细胞进行流式细胞检测，或用结合Fab片段的抗体或protein L等检测CAR蛋白中的scFv片段。对于检测T细胞中的TCR蛋白的表达，常用特异针对某TCR的HLA和多肽的复合物对T细胞进行流式检测。但这些方法存在明显的局限性：qPCR检测基因拷贝数方法不能准确反映表达CAR的T细胞，因为对于整合了CAR基因但未正常表达CAR蛋白的细胞，使用qPCR检测方法会造成检测的假阳性；而对于CAR蛋白阳性的T细胞的检测方法，Fab抗体的检测背景值较高，容易造成假阳性；protein L只适用于检测带有κ轻链的scFv的CAR，而针对CAR蛋白中scFv片段的抗体，以及针对TCR的HLA和多肽复合物，则需要针对不同的CAR蛋白或TCR筛选出不同的抗体或复合物，并建立相关检测方法，耗时长，效率低，成本高。如果能开发出一种准确、灵敏且通用的抗体检测CAR-T，将大大提高基因转导的细胞治疗药物的检测效率，降低检测成本。

发明内容

本发明公开了一种特异性结合Strep-Tag II标签的分离的抗体，其包括：重链可变区（以下缩写为VH）和轻链可变区（以下缩写为VL），其中所述VH包括：包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的VH-CDR2和包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4的氨基酸序列的VH-CDR3；所述VL包括：包含SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6的氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL-CDR2和包含SEQID NO:9或SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL-CDR3。

在一些实施方案中，一种特异性结合Strep-Tag II标签的分离的抗体，其包括：重链可变区和轻链可变区，其中所述重链可变区包括：由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成的VH-CDR1，由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的VH-CDR2和由SEQ ID NO:3或SEQ IDNO:4所示的氨基酸序列组成的VH-CDR3；所述轻链可变区包括：由SEQ ID NO:5或SEQ IDNO:6的氨基酸序列所示的VL-CDR1，由SEQ ID NO:7 或SEQ ID NO:8的氨基酸序列所示的VL-CDR2和由SEQ ID NO:9 或SEQ ID NO:10的氨基酸序列所示的VL-CDR3。

在一些实施方案中，所述VH包括：包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的VH-CDR2和包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的VH-CDR3。