[发明专利]基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系及制备方法

说明书

本发明公开了基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系的制备方法，包括如下步骤：①通过细乳液聚合法制备出含羧基的负载阿霉素(DOX)的纳米凝胶(NL@DOX)；②采用N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)/1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙烯)碳二亚酰胺酸盐(EDC)活化后，将氨基化石墨烯量子点与含有羧基基团的负载阿霉素(DOX)的纳米凝胶通过氨羧络合反应结合，再键合含有氨基的主动靶向药物赫赛汀(Hereceptin)，制备得基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系(FNL@DOX@Herceptin)。本发明的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系分散性好且均匀分布、生物相容性好，具有优良的荧光性能。

技术领域

本发明涉及纳米材料领域和生物技术领域，具体涉及基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系及其制备方法。

背景技术

癌症，已然成为公共卫生安全的重大挑战。随着我国经济的发展，肿瘤病发率逐渐增长，是目前我国最为关注的问题。传统的治疗方法如化疗，放疗都具有很大的局限性，效益很低。随着我国医疗水平不断改善，又增加了很多肿瘤治疗方法，如手术切除、靶向治疗等，其中靶向治疗的治疗效果最好，因此具有靶向治疗的智能纳米水水凝胶在治疗肿瘤的医疗领域上有很大的突破。

阿霉素(DOX)是一种已临床使用的高成效的抗生素类蒽环类的抗肿瘤抗生素，可抑制核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)的合成，对RNA的抑制作用最强，抗瘤谱较广，对多种肿瘤均有作用，属周期非特异性药物，对各种生长周期的肿瘤细胞都有杀灭作用。其作用机理主要是该品嵌入DNA而抑制核酸的合成。临床研究显示阿霉素(DOX)治疗肿瘤癌具有较好的疗效，但是药物长期使用形成积累会导致诸多如心脏毒性等严重不良反应。

赫赛汀(Hereceptin)是能杀灭癌细胞，可以作为单一治疗或联合治疗肿瘤，有很好的治疗效果。人体中HER2过量是导致癌症发生最主要的原因。靶向治疗是只杀死所指定的癌细胞，而赫赛汀(Hereceptin)药物可以实现这一目标。加入赫赛汀(Hereceptin)能够阻断生长信号和HER2的结合，从而使癌细胞生长停滞，甚至使癌细胞死亡。

目前，尚未有荧光成像的靶向纳米凝胶负载阿霉素(DOX)及赫赛汀(Hereceptin)并用于肿瘤癌治疗中的研究或报道。本发明开发了具有细胞毒性强，对肿瘤细胞有良好的杀灭性药物阿霉素(DOX)及主动靶向药物赫赛汀(Hereceptin)负载率高的基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系。

发明内容

本发明的目的是基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系制备方法。该方法制备的纳米凝胶载药体系具有分布均匀、荧光性能好、稳定性好、生物相容性好、药物负载量高等优点，在纳米药物载体领域具有广泛的应用。

为达到本发明的目的，本发明的技术方案包括以下步骤：①通过细乳液聚合法制备出含羧基的负载阿霉素(DOX)的纳米水凝胶；②采用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)/1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚酰胺酸盐(EDC)活化后，将实自制的氨基化石墨烯量子点与含有羧基基团的负载阿霉素(DOX)的纳米凝胶通过氨羧络合反应结合，再键合含有氨基的主动靶向药物赫赛汀(Hereceptin)，制备得基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系。③采用红外光谱仪、纳米粒度仪、透射电镜、荧光光谱仪对基于HER2受体的靶向荧光纳米凝胶载药体系进行基础性能表征。通过紫外分光光度计、酶标仪、荧光显微镜等对荧光成像的靶向纳米凝胶载药的药物负载情况、缓释性能进行研究，以及与乳腺癌MCF-7细胞共培育用MTT法进行细胞毒性测试。

具体步骤为：

步骤1：通过细乳液聚合法制备出含羧基的负载阿霉素(DOX)的纳米水凝胶